我现在在做血小板内Ca2+测定,用兔血,2%EDTA-Na2抗凝,制备洗涤血小板,然后用HEPES液混悬。但是发现几次洗涤后,血小板都在管低成碎片了,没办法混悬起来,不知各位大侠有什么经验没有,可否赐教,非常感谢!
另外,我用Fura2/AM染色后,用双波长荧光检测,为什么激发波长不在340、380,我用的是perkinLC-55S型荧光分光光度计。
也可以和我E-mai联系,lay_yeung@yahoo.com.cn
我想有以下几个原因可供参考:1.离心力是否太大 2.离心时间 3.合理控制室温
还有一些别的原因,我认为应该先从这几个方面检查一下,找出合适的实验条件
感谢楼上的帮助。还有其它经验可以提供吗,谢谢!
我也做血小板内钙离子的测定,前处理没有发生聚集破碎,我是用多功能读板机测定荧光的,但是在加入ADP和凝血酶后,没有发现钙离子浓度上升??
另外,我用Fura2/AM染色后,用双波长荧光检测,为什么激发波长不在340、380,我用的是perkinLC-55S型荧光分光光度计。
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我想有以下几个原因可供参考:1.离心力是否太大 2.离心时间 3.合理控制室温
还有一些别的原因,我认为应该先从这几个方面检查一下,找出合适的实验条件
感谢楼上的帮助。还有其它经验可以提供吗,谢谢!
我也做血小板内钙离子的测定,前处理没有发生聚集破碎,我是用多功能读板机测定荧光的,但是在加入ADP和凝血酶后,没有发现钙离子浓度上升??