大家有没有用过减压柱层析的?对于柱子一般装多高?样品层又多高?二者有没有一定的比例??如何根据薄层展开来选择过柱子的比例(或者说一般把Rf值控制在什么范围内,比较适合上住)??了!!!
同问,学习ing~
减压柱优点在于上样量大,缺点在于分离效果较差。我前段时间做工艺跑了一年的减压柱,给你总结下吧。
1:上样,我们做植化采用的是直径30cm的布氏漏斗,上样量最多150g,拌样硅胶200g,柱硅胶400g左右,这时候柱硅胶基本上比拌好的样品就高一点。做工艺的时候,只要其中的一个单体,上下距离比较远的情况,采用直径80CM的布氏漏斗,样品一公斤,拌样硅胶1.5kg,柱硅胶1kg,这时候柱硅胶远低于拌好的样品。
2:洗脱,一搬3个柱体积一个梯度,植化粗分时候基本7到8个梯度,100-200g样品2天内完成。
最大的特点是上样量大,以前大柱子上样最多也就几百克,要跑一个月,现在可以上1kg 的样品,最快两天就能跑完,粗分的话效果和普通大柱子差不多,而且可以减少大极性样品的死吸附。
缺点:几十克到十几克的样品就不推荐了,普通的加压柱就可以搞定,效果一般都比较好
现在我还有个问题 就是咱们装的常压柱在下边接一个真空泵进行减压,这种能不能算减压柱色谱啊 ???这种效果怎么样啊???
一样一样,只要抽干就是减压柱
这个和书中提到的不一样啊 唉 指点啊 呵呵
同问,学习ing~
减压柱优点在于上样量大,缺点在于分离效果较差。我前段时间做工艺跑了一年的减压柱,给你总结下吧。
1:上样,我们做植化采用的是直径30cm的布氏漏斗,上样量最多150g,拌样硅胶200g,柱硅胶400g左右,这时候柱硅胶基本上比拌好的样品就高一点。做工艺的时候,只要其中的一个单体,上下距离比较远的情况,采用直径80CM的布氏漏斗,样品一公斤,拌样硅胶1.5kg,柱硅胶1kg,这时候柱硅胶远低于拌好的样品。
2:洗脱,一搬3个柱体积一个梯度,植化粗分时候基本7到8个梯度,100-200g样品2天内完成。
最大的特点是上样量大,以前大柱子上样最多也就几百克,要跑一个月,现在可以上1kg 的样品,最快两天就能跑完,粗分的话效果和普通大柱子差不多,而且可以减少大极性样品的死吸附。
缺点:几十克到十几克的样品就不推荐了,普通的加压柱就可以搞定,效果一般都比较好
现在我还有个问题 就是咱们装的常压柱在下边接一个真空泵进行减压,这种能不能算减压柱色谱啊 ???这种效果怎么样啊???
一样一样,只要抽干就是减压柱
这个和书中提到的不一样啊 唉 指点啊 呵呵