我刚做植化不久，对于上柱子梯度洗脱还不懂。是不是一个梯度要洗脱完所有的东西知道没有颜色为止。望高手指点一下。

没有必要，一般五个柱体积为一个梯度，这样效率比较高，没分开可以再上个小柱子


那就是说5个柱体积之后再换一个梯度进行洗脱是吗？

是的，粗分一半就梯度一直换下去，细分基本几个梯度就完事了，事先先用薄层板摸好条件


啊


我也想问下一般怎么来判断什么时候换梯度，要是柱体积大的硅胶柱，怎么洗都有东西下来，也要洗五个柱体积才能换梯度吗？

可以点板看看你的东西在这个梯度下还走不走了


看你是粗分还是细分了，粗分砍断就是按固定的柱体积就够了，你的意思是不想过五个柱体积吗，其实5个柱体积已经很少了，算一下按6个梯度，5个柱体积才三十瓶，对一个粗分已经很少了。细分的话有时候一个梯度就可以了，再点板看你需要的点下来就可以了

在你决定过柱子之前，你可以先点板确定一下洗脱条件，上柱子之后随时点板跟踪你收集的组分，你原来的样品要保留一点点样


跑薄层的时候摸好的条件就是上柱子洗脱剂比例吗，不是说要更小一点就可以吗？这是什么意思啊？