最近需要做相关的实验，请教各位关于建立鼠子宫内膜异位症动物模型的相关内容，如果能接受外包实验的实验室更好！我邮箱：zhanglihua00407@163.com , 谢谢！
发布日期
20061123
栏目
中药药物评价>>非临床安全性和有效性评价
标题
对子宫内膜异位症动物模型的认识
作者
笪红远
部门
正文内容
审评二部 笪红远
子宫内膜异位症（简称内异症，英文为：endometriosis，缩写为EMT。）是子宫内膜间质细胞和上皮细胞种植于子宫腔以外的妇科良性疾病，就是指有活动功能的子宫内膜出现在子宫内壁以外的部位生长。内异症是一种常见到妇科疾病，育龄妇女发病率可达10～15％，是引起月经失调、痛经和不孕的主要原因之一，由于发病机理未被最终阐明，目前尚未有理想到根治方法，因而成为妇科领域的重要研究热点之一。
从140多年前报道该病以来，但对它的深入研究只有70多年的历史。随组织培养学的发展及在体和体外的实验不断开展，动物模型的研究成果起到了使我们可以从不同层面了解和认识该病机制的重要作用。
一、EMT模型研究的现状
（一）、体外模型：
体外模型在医学研究中有着悠久的历史，目前EMT比较常用的体外模型是细胞培养。将子宫内膜组织经过酶消化、筛网分离等，再进行体外培养。体外细胞的分离和培养不影响细胞生物学特性及表面蛋白的表达。由于异位内膜培养的成功率低于在位内膜，且取材的部位及方法对异位内膜的培养成功有较大的影响。用在位子宫内膜体外培养可作为EMT的研究模型。细胞培养不仅可以观察子宫内膜细胞增长、侵袭、转移等情况，而且还可以进行细胞化学、超微结构、生物学特性和分子生物学方面的研究。
但体外模型对EMT的研究缺乏整体环境，有明显局限性，毕竟疾病的发生与整体内、外环境都有密切的关系。所以EMT体外模型在进行药物有效性研究方面，药物研究中目前应用很少。
（二）、体内模型：
体内动物模型可用于EMT的遗传学、免疫学、分子生物学及内分泌等多方面的研究，也可探索EMT的高危因素、预防措施、治疗措施及对各种治疗方法进行疗效评价。目前常用的动物有狒狒、猴、大鼠和小鼠。EMT动物模型可分为自发性和诱发性模型。
1、自发性EMT模型：自然发生的前提是有月经周期，除人以外，只有灵长类动物有月经，如：狒狒、恒河猴、狝猴等。此类动物模型没有人为因素，比较接近自然发生的疾病，因此灵长类动物在EMT的研究中是最有潜力的。但自发性动物模型的应用受到诸多制约，动物价格昂贵、有些类别动物是保护动物；动物发病率低、观察时间长、饲养条件要求高；实验费用高等。
灵长类在组织结构、生理和代谢功能等方面同人类游很多相似之处，采用灵长类动物建立动物模型明显优于其他动物；其次，它们的内分泌、月经周期和解剖结构与妇女有很多相似之处。但由于实验条件要求较高，使应用受到了限制，啮齿类动物模型的研究和应用变得更为广泛。
2、诱发性EMT模型：根据Sampson的经血逆流种植学说，用外科手术法直接将自体子宫内膜移植到子宫腔外的部位；或通过手术闭锁子宫颈或阴道，造成经血逆流而诱发EMT。手术移植法造模法是国内外报道建立EMT模型的主要方法。
（1）大鼠EMT模型：大鼠SD、Lewis、Wister种，选用成熟雌性大鼠，切取子宫角组织一块，分离出内膜组织并将其缝合在腹膜上、卵巢或子宫上段附近，子宫内膜面向腹腔。绝大多数文献报道大鼠EMT模型选用动物是动情期成熟雌性大鼠，因为此期间动物子宫内膜上皮细胞活跃、体液免疫反应敏感等；但也有采用非动情期大鼠造成EMT模型。同时造成动情期大鼠40只和非动情期大鼠40只得EMT模型，实验研究对比了两类模型，结果证实非动情期进行子宫组织自体异位种植术成模率95％，与大鼠动情期进行子宫组织自体异位种植术成模率94.8％比较，经统计学处理二者差异无显著性；异位内膜上皮细胞活跃，有类似正位子宫内膜的周期变化，其生理特征与正位子宫内膜基本相同；且造模后大鼠体液免疫反应敏感，结论证实大鼠非动情期和动情期进行子宫组织自体异位种植术均可建立良好的子宫内膜异位症模型。
制作动物模型如选择在动物动情期，诸多因素对实验会造成干扰；通过动情期和非动情期造模动物的比较，得出的结论认为在选择成熟雌性动物上没有差别，这样结果对选择于造模动物非常有益。大鼠EMT模型可以广泛应用于对EMT发病机理的研究、新药有效性检测和机理研究、以及探索新的治疗方法。但是，大鼠无月经周期和自发性EMT，虽有排卵但黄体周期比人类要短的多，使得在大鼠身上的研究结果在实际应用受到很大限制。
（2）小鼠EMT模型：动物选用的是免疫缺陷小鼠，目前应用较多的是裸鼠和严重联合免疫缺陷（Severe combined immunodeficiency,SCID）小鼠。
皮下种植法：从剖宫术获子宫切除术的患者获取子宫内膜组织标本，经过系列准备后，将子宫内膜切成小块种植于裸鼠皮下。腹腔注射种植法：子宫内膜组织标本经过系列准备后，制成小块悬浮于青、链霉素的PBS液中，注射入SCID小鼠腹腔内。术后肌注雌二醇促进子宫内膜组织生长，抗生素预防感染。
裸鼠和SCID小鼠都是免疫缺陷动物，能成功接种多种异体组织，种植后的组织仍保留原来的组织形态和生化特征以及对激素的反应，可以保持人的细胞核型等特性，可以应用于研究子宫内膜异位症形成的“粘附、侵袭、血管形成”过程。但裸鼠和SCID小鼠是免疫缺陷动物，无法用于研究EMT病灶引起的机体免疫学方面的改变。EMT患者腹腔液的免疫学方面的变化对EMT的发生、发展有着密切的关系，免疫缺陷小鼠的腹腔液与正常小鼠有所不同，这对移植的内膜组织的粘附、侵袭、增长可能有直接到影响。
目前的肿瘤研究领域中，有学者建立肿瘤动物模型时，用成人的外周血淋巴细胞进行腹腔注射建立免疫重建SCID小鼠模型。通过检测小鼠外周血清人IgG含量、测脾细胞观察免疫功能重建情况。这样方法是否也可以用于EMT的免疫学研究，目前没有文献报道这方面的研究情况，但是EMT与肿瘤有许多相似点，建立免疫重建EMT SCID小鼠模型的可行性较大。
（3）近年国外成功建立了有免疫力小鼠的EMT模型，BALB/c小鼠去卵巢后，补充雌激素统一，一周后，将供体小鼠的子宫内膜分离、切碎，注入受体小鼠腹腔，术后补充雌激素。优点类似于人类的发病机制，具有正常的免疫力；缺点是经过三次手术创伤，易死亡，病灶小，不易观察。 2 1 2 下一页 尾页
发布日期
20061123
栏目
中药药物评价>>非临床安全性和有效性评价
标题
对子宫内膜异位症动物模型的认识
作者
笪红远
部门
正文内容
审评二部 笪红远
子宫内膜异位症（简称内异症，英文为：endometriosis，缩写为EMT。）是子宫内膜间质细胞和上皮细胞种植于子宫腔以外的妇科良性疾病，就是指有活动功能的子宫内膜出现在子宫内壁以外的部位生长。内异症是一种常见到妇科疾病，育龄妇女发病率可达10～15％，是引起月经失调、痛经和不孕的主要原因之一，由于发病机理未被最终阐明，目前尚未有理想到根治方法，因而成为妇科领域的重要研究热点之一。
从140多年前报道该病以来，但对它的深入研究只有70多年的历史。随组织培养学的发展及在体和体外的实验不断开展，动物模型的研究成果起到了使我们可以从不同层面了解和认识该病机制的重要作用。
一、EMT模型研究的现状
（一）、体外模型：
体外模型在医学研究中有着悠久的历史，目前EMT比较常用的体外模型是细胞培养。将子宫内膜组织经过酶消化、筛网分离等，再进行体外培养。体外细胞的分离和培养不影响细胞生物学特性及表面蛋白的表达。由于异位内膜培养的成功率低于在位内膜，且取材的部位及方法对异位内膜的培养成功有较大的影响。用在位子宫内膜体外培养可作为EMT的研究模型。细胞培养不仅可以观察子宫内膜细胞增长、侵袭、转移等情况，而且还可以进行细胞化学、超微结构、生物学特性和分子生物学方面的研究。
但体外模型对EMT的研究缺乏整体环境，有明显局限性，毕竟疾病的发生与整体内、外环境都有密切的关系。所以EMT体外模型在进行药物有效性研究方面，药物研究中目前应用很少。
（二）、体内模型：
体内动物模型可用于EMT的遗传学、免疫学、分子生物学及内分泌等多方面的研究，也可探索EMT的高危因素、预防措施、治疗措施及对各种治疗方法进行疗效评价。目前常用的动物有狒狒、猴、大鼠和小鼠。EMT动物模型可分为自发性和诱发性模型。
1、自发性EMT模型：自然发生的前提是有月经周期，除人以外，只有灵长类动物有月经，如：狒狒、恒河猴、狝猴等。此类动物模型没有人为因素，比较接近自然发生的疾病，因此灵长类动物在EMT的研究中是最有潜力的。但自发性动物模型的应用受到诸多制约，动物价格昂贵、有些类别动物是保护动物；动物发病率低、观察时间长、饲养条件要求高；实验费用高等。
灵长类在组织结构、生理和代谢功能等方面同人类游很多相似之处，采用灵长类动物建立动物模型明显优于其他动物；其次，它们的内分泌、月经周期和解剖结构与妇女有很多相似之处。但由于实验条件要求较高，使应用受到了限制，啮齿类动物模型的研究和应用变得更为广泛。
2、诱发性EMT模型：根据Sampson的经血逆流种植学说，用外科手术法直接将自体子宫内膜移植到子宫腔外的部位；或通过手术闭锁子宫颈或阴道，造成经血逆流而诱发EMT。手术移植法造模法是国内外报道建立EMT模型的主要方法。
（1）大鼠EMT模型：大鼠SD、Lewis、Wister种，选用成熟雌性大鼠，切取子宫角组织一块，分离出内膜组织并将其缝合在腹膜上、卵巢或子宫上段附近，子宫内膜面向腹腔。绝大多数文献报道大鼠EMT模型选用动物是动情期成熟雌性大鼠，因为此期间动物子宫内膜上皮细胞活跃、体液免疫反应敏感等；但也有采用非动情期大鼠造成EMT模型。同时造成动情期大鼠40只和非动情期大鼠40只得EMT模型，实验研究对比了两类模型，结果证实非动情期进行子宫组织自体异位种植术成模率95％，与大鼠动情期进行子宫组织自体异位种植术成模率94.8％比较，经统计学处理二者差异无显著性；异位内膜上皮细胞活跃，有类似正位子宫内膜的周期变化，其生理特征与正位子宫内膜基本相同；且造模后大鼠体液免疫反应敏感，结论证实大鼠非动情期和动情期进行子宫组织自体异位种植术均可建立良好的子宫内膜异位症模型。
制作动物模型如选择在动物动情期，诸多因素对实验会造成干扰；通过动情期和非动情期造模动物的比较，得出的结论认为在选择成熟雌性动物上没有差别，这样结果对选择于造模动物非常有益。大鼠EMT模型可以广泛应用于对EMT发病机理的研究、新药有效性检测和机理研究、以及探索新的治疗方法。但是，大鼠无月经周期和自发性EMT，虽有排卵但黄体周期比人类要短的多，使得在大鼠身上的研究结果在实际应用受到很大限制。
（2）小鼠EMT模型：动物选用的是免疫缺陷小鼠，目前应用较多的是裸鼠和严重联合免疫缺陷（Severe combined immunodeficiency,SCID）小鼠。
皮下种植法：从剖宫术获子宫切除术的患者获取子宫内膜组织标本，经过系列准备后，将子宫内膜切成小块种植于裸鼠皮下。腹腔注射种植法：子宫内膜组织标本经过系列准备后，制成小块悬浮于青、链霉素的PBS液中，注射入SCID小鼠腹腔内。术后肌注雌二醇促进子宫内膜组织生长，抗生素预防感染。
裸鼠和SCID小鼠都是免疫缺陷动物，能成功接种多种异体组织，种植后的组织仍保留原来的组织形态和生化特征以及对激素的反应，可以保持人的细胞核型等特性，可以应用于研究子宫内膜异位症形成的“粘附、侵袭、血管形成”过程。但裸鼠和SCID小鼠是免疫缺陷动物，无法用于研究EMT病灶引起的机体免疫学方面的改变。EMT患者腹腔液的免疫学方面的变化对EMT的发生、发展有着密切的关系，免疫缺陷小鼠的腹腔液与正常小鼠有所不同，这对移植的内膜组织的粘附、侵袭、增长可能有直接到影响。
目前的肿瘤研究领域中，有学者建立肿瘤动物模型时，用成人的外周血淋巴细胞进行腹腔注射建立免疫重建SCID小鼠模型。通过检测小鼠外周血清人IgG含量、测脾细胞观察免疫功能重建情况。这样方法是否也可以用于EMT的免疫学研究，目前没有文献报道这方面的研究情况，但是EMT与肿瘤有许多相似点，建立免疫重建EMT SCID小鼠模型的可行性较大。
（3）近年国外成功建立了有免疫力小鼠的EMT模型，BALB/c小鼠去卵巢后，补充雌激素统一，一周后，将供体小鼠的子宫内膜分离、切碎，注入受体小鼠腹腔，术后补充雌激素。优点类似于人类的发病机制，具有正常的免疫力；缺点是经过三次手术创伤，易死亡，病灶小，不易观察。 2 1 2 下一页 尾页