在肝微粒体试验中，制备好微粒体后必须要对P450酶系进行定量，首先是要测其中的蛋白浓度对吧……我用的是Lowry法，但是近来测了几次，得到的结果都很不理想，首先对于标曲而言，不是线性良好与否的问题，而是吸光值于不同的浓度有时候高浓度的吸光值低于低浓度，有时候空白（即0）浓度的吸光值与接下来的系列浓度的前几个浓度吸光值一样，不明点解?实验大致步骤如下：First,是溶液的配制（2N的Naoh溶液与2%的碳酸钠溶液；1%的酒石酸钾钠+1%的硫酸铜；其中前者与后者按照50:1的体积配制为福林酚-甲，福林酚-乙是购买的1N浓度)；Second，配制100ug/ml的牛血清蛋白（用2N的Naoh稀释），分别取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml,不够1ml的以Naoh补充至1ml;third:每个试管中加入5ml福林酚-甲，室温10min放置，随后0.5ml福林酚-乙，30min室温放置；最后，用Naoh 仪器调零，于750nm测定A……




可能是微粒体 中杂质的影响，建议使用非干扰型蛋白浓度测定试剂盒 （SK3071）