如题,我们做药代常用的萃取、沉淀蛋白方法处理后分析得到的血药浓度,是游离药物浓度还是包含了血浆蛋白结合的药物?
自问自答一下,请高手指点正确否。
沉淀蛋白的方法因蛋白变性,疏松结合于上的药物将游离出来,因此测得的浓度为总血浆药物浓度;液-液萃取因为结合在蛋白上的药物易被萃取液提取出来,因此也是总血浆药物浓度。
不知上述理解对否,请大家指点
实际上检测到得是游离的药物浓度,结合的药物除非用酶解或其他方法才能游离下来。但这个测试到的浓度却代表的是血浆中药物总浓度。想一下实验所建立的方法就会明白(标准曲线等)。并不是血浆样品处理方法不同就会导致其代表的意义有差别。
关注一下
我认为检测到的是全部药物浓度,结合的药物在处理过程中将会发生解离。不同处理方法可能对解离程度有影响,但应该认为检测到的是全部浓度。
是包括血浆蛋白结合的浓度
我也觉得是全部血浆中的药物浓度,包括结合率高达99%的样品, 也可以用直接沉淀蛋白的方法做。药物与血浆蛋白结合多数属于疏水基的相互作用,蛋白变性以后药物应该是解离出来的!个人看法,未深究文献, 欢迎拍砖!
不知道是不是这么理解,处理样品过程中未必能100%不损失,否则就没有回收率一说了,但仪器测得的响应值经标曲换算后得到的浓度却是游离型和结合型的总和,因为制备标曲的样品是在空白血浆中加入了不同浓度的药液,再根据仪器响应值绘制的标曲,基本排除了回收率的影响,所以最后得到的血药浓度数据是游离型和结合型的总和。
认同大家的意见。
补充一点:透析液中的药物浓度近似血液中游离型药物浓度,但理论上在充分交换的前提下应该高于后者。
研究C-E,以游离型药物浓度为指标更为准确一下,相对而言。
不太认同 因为最近在做药代 所以看了一些书 想要使结合在蛋白上的药物游离下来是非常复杂的 比较常规的是使用超滤膜一万以上的速度离心才行 还分离的不一定~~~(一个超滤膜比离心管就多一个滤膜,但是要十元,离心管多便宜大家都知道了吧~~~)
nonsense。测得的肯定是总的药浓。。。现在只能测定游离药浓的方法还在探索中啊,我们一般常用的蛋白沉淀法和液液萃取法都是经典方法,石把游离药和结合药一起测得。。。。
个人认为测得的应该是总血药浓度,理由同二楼,无论是提取法还是沉淀法,最终蛋白都是被变性处理了,血浆中的药物应该都会被响应~~~
如果你要测游离,离心做血清,就ok了,不用来问。
如大家所讨论的,我在一本药代书籍中看过,书上说是我们检测的是游离加结合的药物总和,理由和大家讨论的差不多,结合是可逆的,在咱们处理样品的过程中,结合的药物基本全部被游离出来。
TDM的基本常识:总浓度.
目前大家测血药浓度的基质常规是血浆,测定结果就是总浓度。还有一种情况,就是血清浓度,这才是游离浓度。
目前没有特别提到,药代研究中测得的浓度都是总浓度,其实真正起作用的是游离药物,只有游离药物浓度才与药效成正比,所以最理想的是测其游离药物浓度。
应该测得是总药物浓度,游离浓度的话应该用蛋白结合率的测定方法求得的吧,比如平衡透析法,或超滤法
测定的是总浓度,另外一些微粒制剂静脉注射测定到药物包括游离、被微粒包封或包裹和蛋白结合等,文献报道微渗析可以测定血浆中游离药物浓度,但存在平衡等问题,尤其代谢较快的药物结果误差很大。
因该是游离的药物 浓度,结合的药物需要用特定的酶进行解离后才可测得
本人也是做药代的,现在对于测定的血药浓度是游离药物的的血药浓度还是总的药物的浓度,书本上提到的不多,但是有提及,比如《生物药物分析》这本书上,有人做过实验,不同的药物用类似的方法进行提取分离药物时,结果不同的药物被提取出来的百分率是不一样的,也就是说血浆中的药物是否被完全提取出来,要看两个方面的因素:一是前处理的方法,二就是看药物与血浆蛋白结合的牢固程度,不能一概而论。
近期实验感想 如果这样就可以得到总浓度的话,那实验真的是太简单了。大家可以做两个实验试试。1、直接把药物从老鼠尾静脉推进去,十分钟后眼眶取血,有一些药这样是测不到的。2、更简单的,我现在再做也证明出来了。直接在体外,把药物加到全血里,混匀,然后检测。对比直接加到血浆和血清里的,做过了结果就知道了。这个问题实验是最好的解答
PPP、LLE和SPE处理血浆样品中测得的药物浓度是总浓度,游离浓度想想蛋白沉淀的做法,有篇文献供参考
Rapid and direct measurement of free concentrations of highly protein-bound fluoxetine and its metabolite norfluoxetine in plasma.
Guo B, Li C, Wang G, Chen L.
Rapid Commun Mass Spectrom. 2006;20(1):39-47.
总浓度啊!
近期实验感想 如果这样就可以得到总浓度的话,那实验真的是太简单了。大家可以做两个实验试试。1、直接把药物从老鼠尾静脉推进去,十分钟后眼眶取血,有一些药这样是测不到的。2、更简单的,我现在再做也证明出来了。直接在体外,把药物加到全血里,混匀,然后检测。对比直接加到血浆和血清里的,做过了结果就知道了。这个问题实验是最好的解答
对于这个测定结果的区别本来就存在拉 相当于方法学中的回收率试验啊 比较直接的原因是样品前处理方法的损失吧? 另外你说的第一种情况是不是药物在大鼠体内已经代谢或转化了 只是测不到原型化合物啊
我个人感觉觉得是总浓度 因为样品的前处理过程一般都破换了蛋白的空间结果或是使药物游离进入到更容易溶解的介质中了 所以应该是总的血浆浓度
近期实验感想 如果这样就可以得到总浓度的话,那实验真的是太简单了。大家可以做两个实验试试。1、直接把药物从老鼠尾静脉推进去,十分钟后眼眶取血,有一些药这样是测不到的。2、更简单的,我现在再做也证明出来了。直接在体外,把药物加到全血里,混匀,然后检测。对比直接加到血浆和血清里的,做过了结果就知道了。这个问题实验是最好的解答 2 1 2 下一页 尾页
自问自答一下,请高手指点正确否。
沉淀蛋白的方法因蛋白变性,疏松结合于上的药物将游离出来,因此测得的浓度为总血浆药物浓度;液-液萃取因为结合在蛋白上的药物易被萃取液提取出来,因此也是总血浆药物浓度。
不知上述理解对否,请大家指点
实际上检测到得是游离的药物浓度,结合的药物除非用酶解或其他方法才能游离下来。但这个测试到的浓度却代表的是血浆中药物总浓度。想一下实验所建立的方法就会明白(标准曲线等)。并不是血浆样品处理方法不同就会导致其代表的意义有差别。
关注一下
我认为检测到的是全部药物浓度,结合的药物在处理过程中将会发生解离。不同处理方法可能对解离程度有影响,但应该认为检测到的是全部浓度。
是包括血浆蛋白结合的浓度
我也觉得是全部血浆中的药物浓度,包括结合率高达99%的样品, 也可以用直接沉淀蛋白的方法做。药物与血浆蛋白结合多数属于疏水基的相互作用,蛋白变性以后药物应该是解离出来的!个人看法,未深究文献, 欢迎拍砖!
不知道是不是这么理解,处理样品过程中未必能100%不损失,否则就没有回收率一说了,但仪器测得的响应值经标曲换算后得到的浓度却是游离型和结合型的总和,因为制备标曲的样品是在空白血浆中加入了不同浓度的药液,再根据仪器响应值绘制的标曲,基本排除了回收率的影响,所以最后得到的血药浓度数据是游离型和结合型的总和。
认同大家的意见。
补充一点:透析液中的药物浓度近似血液中游离型药物浓度,但理论上在充分交换的前提下应该高于后者。
研究C-E,以游离型药物浓度为指标更为准确一下,相对而言。
不太认同 因为最近在做药代 所以看了一些书 想要使结合在蛋白上的药物游离下来是非常复杂的 比较常规的是使用超滤膜一万以上的速度离心才行 还分离的不一定~~~(一个超滤膜比离心管就多一个滤膜,但是要十元,离心管多便宜大家都知道了吧~~~)
nonsense。测得的肯定是总的药浓。。。现在只能测定游离药浓的方法还在探索中啊,我们一般常用的蛋白沉淀法和液液萃取法都是经典方法,石把游离药和结合药一起测得。。。。
个人认为测得的应该是总血药浓度,理由同二楼,无论是提取法还是沉淀法,最终蛋白都是被变性处理了,血浆中的药物应该都会被响应~~~
如果你要测游离,离心做血清,就ok了,不用来问。
如大家所讨论的,我在一本药代书籍中看过,书上说是我们检测的是游离加结合的药物总和,理由和大家讨论的差不多,结合是可逆的,在咱们处理样品的过程中,结合的药物基本全部被游离出来。
TDM的基本常识:总浓度.
目前大家测血药浓度的基质常规是血浆,测定结果就是总浓度。还有一种情况,就是血清浓度,这才是游离浓度。
目前没有特别提到,药代研究中测得的浓度都是总浓度,其实真正起作用的是游离药物,只有游离药物浓度才与药效成正比,所以最理想的是测其游离药物浓度。
应该测得是总药物浓度,游离浓度的话应该用蛋白结合率的测定方法求得的吧,比如平衡透析法,或超滤法
测定的是总浓度,另外一些微粒制剂静脉注射测定到药物包括游离、被微粒包封或包裹和蛋白结合等,文献报道微渗析可以测定血浆中游离药物浓度,但存在平衡等问题,尤其代谢较快的药物结果误差很大。
因该是游离的药物 浓度,结合的药物需要用特定的酶进行解离后才可测得
本人也是做药代的,现在对于测定的血药浓度是游离药物的的血药浓度还是总的药物的浓度,书本上提到的不多,但是有提及,比如《生物药物分析》这本书上,有人做过实验,不同的药物用类似的方法进行提取分离药物时,结果不同的药物被提取出来的百分率是不一样的,也就是说血浆中的药物是否被完全提取出来,要看两个方面的因素:一是前处理的方法,二就是看药物与血浆蛋白结合的牢固程度,不能一概而论。
近期实验感想 如果这样就可以得到总浓度的话,那实验真的是太简单了。大家可以做两个实验试试。1、直接把药物从老鼠尾静脉推进去,十分钟后眼眶取血,有一些药这样是测不到的。2、更简单的,我现在再做也证明出来了。直接在体外,把药物加到全血里,混匀,然后检测。对比直接加到血浆和血清里的,做过了结果就知道了。这个问题实验是最好的解答
PPP、LLE和SPE处理血浆样品中测得的药物浓度是总浓度,游离浓度想想蛋白沉淀的做法,有篇文献供参考
Rapid and direct measurement of free concentrations of highly protein-bound fluoxetine and its metabolite norfluoxetine in plasma.
Guo B, Li C, Wang G, Chen L.
Rapid Commun Mass Spectrom. 2006;20(1):39-47.
总浓度啊!
近期实验感想 如果这样就可以得到总浓度的话,那实验真的是太简单了。大家可以做两个实验试试。1、直接把药物从老鼠尾静脉推进去,十分钟后眼眶取血,有一些药这样是测不到的。2、更简单的,我现在再做也证明出来了。直接在体外,把药物加到全血里,混匀,然后检测。对比直接加到血浆和血清里的,做过了结果就知道了。这个问题实验是最好的解答
对于这个测定结果的区别本来就存在拉 相当于方法学中的回收率试验啊 比较直接的原因是样品前处理方法的损失吧? 另外你说的第一种情况是不是药物在大鼠体内已经代谢或转化了 只是测不到原型化合物啊
我个人感觉觉得是总浓度 因为样品的前处理过程一般都破换了蛋白的空间结果或是使药物游离进入到更容易溶解的介质中了 所以应该是总的血浆浓度
近期实验感想 如果这样就可以得到总浓度的话,那实验真的是太简单了。大家可以做两个实验试试。1、直接把药物从老鼠尾静脉推进去,十分钟后眼眶取血,有一些药这样是测不到的。2、更简单的,我现在再做也证明出来了。直接在体外,把药物加到全血里,混匀,然后检测。对比直接加到血浆和血清里的,做过了结果就知道了。这个问题实验是最好的解答 2 1 2 下一页 尾页