我是纯菜鸟一只啊,最近做到药动实验部分了,打头两个月开始心就慌慌的,怕自己搞不定大鼠内眦取血,虽然本科实验时也练过,但过去太长时间了,早就忘记操作技巧等等。
前天头一次取血,弄得很狼狈,连把老鼠从笼子里抓到乙醚瓶子里都搞不定,简直丢人丢大了,取血时竟然还把毛细管拔了出来(囧),后来又弄了一次,这次竟然毛细管掉了出来,尽管老鼠的眼角血流如注,但流到离心管里的血却是少之又少,不过好在离心后血浆和血细胞分离得挺好,也是个安慰吧。
注意事项:
1.乙醚多放,但不是越多越好,注意不要让蒸气把自己迷晕了;
2.抓老鼠时要张大手掌紧紧地抓住它,使手掌整个包住老鼠身子,不要怕,使劲扔进乙醚瓶中,迅速盖上盖子;
3.多麻醉一会;
4.毛细管要充分浸润肝素,离心管要充分浸润肝素,保证毛细管是湿润状态,离心管要充分浸润肝素后将肝素倒回,尽量不要残留太多肝素,以免影响测定;
5.趁老鼠昏迷时迅速将蘸了肝素的毛细管迅速扎入眼角,扎入时边旋转边深入,一定要扎得深,这样才不会掉出来;
6.血流出时要迅速将老鼠掉转,同时用手扶住毛细管(不要让毛细管掉出大鼠眼角,否则血流很难对准离心管,会滴到别处,就白取了),让另外一个同学拿离心管接住血,要对准,接血过程要迅速;
7.血量接够后,将毛细管拔出,用卫生纸擦拭老鼠眼睛;
8.将老鼠放回笼子,迅速盖上盖子,给老鼠换些垫料,放些鼠粮,换些水,安抚一下,要善待动物。
PS:毛细管不要太长也不要太短,大约2、3厘米就差不多了,太长了血会凝在管子里下不来,比较浪费,太短的话不容易向眼角里深入,注意用毛细管的平头那端,不要用掰断的尖头那端。
取血后要迅速地离心,时间长了容易凝血。
第一次做时简直太挫败了,当时手脚冰冷,血也没取出来几滴。也许是一贯太善良了,觉得眼角取血太残忍,总下不去手,还被同组的人嘲笑,令我很窝火,心想反正不做好就毕不了业,心一横就上了。回来好好地总结了一下经验,反复回顾操作过程中的注意事项,同时别人做的时候也多观察,结果今天再取时就很纯熟了,很迅速地就取好了。
我觉得差不多就这些技巧,有不对的地方请大家指出。
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新手分享经验,鼓励鼓励!
1、不知你的实验中每次取多少毫升血量?如果没特殊要求只是药代动力学的 话,1ml还不够吗?如果是这个血量的话,没有必要在取血的毛细管中浸肝素,只需要在接血的离心管中加入适量比例的肝素(如果1ml血的话,加入20 ul肝素足以)。取血顺利的话,1ml血取够之后立即摇匀离心管,血是不会凝掉的。这样做的好处是,你不感觉毛细管湿着的话不利于血液顺着管腔流出来吗?
2、你说:“取血后要迅速地离心,时间长了容易凝血”,不老恰当的吧?既然加了肝素抗凝,怎么还会“容易凝血”呢?除非加的量不够或者有别的不合适的地方。
3、毛细管并不是扎的“越深越好”,深浅适中最好,能吃上劲儿不掉下来就行。太深有时候反倒不适宜血液流出来,这时候只要把毛细管稍微往外拔一点点即可。如果你以后经常取血,我相信你会遇到这个问题的。
4、就是动物实验的基本操作问题了。我觉得之所以你感觉这次取血较狼狈,确实是因为你的抓取动物这个基本操作还不过关,更别说还要加之目内眦取血这个操作了。其实就是“稳、准、狠”,说是“狠”其实却效果好,因为只有又快又准又狠,才会在乙醚麻醉醒来之前顺利取完血,才会更大的减轻大鼠的疼痛,这其实也就是一种角度的“善待”呢。总比折腾半天下不去手,乙醚麻醉一会就醒,那时候还没取完,它不是更疼吗?
好了,有了第一次的成功,以后就会越来越顺的。动物实验最好的开始就多上手多练习,实践最重要了。祝你好运!
.....貌似我们眼内眦取血从来就不用乙醚麻醉的,直接用手固定好大鼠,毛细血管进眼底,取完一次拔出来,可以对此重复取的,难道非要麻醉??
一般不用麻醉,同于个眼睛部位至少可以取到5个点,两支眼睛取10个没有问题
做大鼠药动学,不麻醉眼眶采血,每次0.2ml,48小时一只大鼠可采18个点。
实际上无论大鼠还是小鼠采血时都要麻醉的,请你不要说不麻醉采血才是高手。那样对动物是很不人道的。在有些国家你可能会被人家告上法庭的。而且疼痛会对动物产生应激反应,对你的实验结果是有影响的。二氧化碳麻醉的方法是很好的,只需一个气瓶,一个透明塑料箱就可以了。当动物肌张力消失了,很容易就可以采出血来。无论如何,要善待动物,你的实验结果才是最好的。
其实,在GLP实验室做大鼠取血都已经不用内眦取血。主要是麻不麻醉对实验都有影响、还会产生溶血。以后在试验设计时可以考虑每组多设几只鼠。
药剂做药动学一般麻醉的多,药理的学生喜欢直接取血,每次取0.5ml一般可取12~13个点,固定大鼠的方法是让大鼠咬住一个固定点,接血稳定,采血很快。关键问题是规范操作
刚开始学习采血都是这样子的,楼主的经验很宝贵,值得初学者学习。
这个帖子好,我刚好准备用大鼠做药动学。多多交流哈!
谢谢分享
想问问楼主,吸收相取点取得比较密时,大鼠内眦取血方便吗?
会不会存在几分钟内不能取的情况呢?
乙醚麻醉大概多久可以醒来?
麻醉的量和时间如何掌握呢?
从来都是不麻醉直接取的
我觉得不麻醉一是不人道,二是大鼠因为疼痛可能会释放一些内源性物质和产生应激反应,导致实验结果有偏差。
xiexie
那到底是麻醉好还是不麻醉好呢?说真的,麻醉后肯定好取一些,也人道一些,但是有老师说这样取出的血不是在常态下的,会影响结果。 2 1 2 下一页 尾页
前天头一次取血,弄得很狼狈,连把老鼠从笼子里抓到乙醚瓶子里都搞不定,简直丢人丢大了,取血时竟然还把毛细管拔了出来(囧),后来又弄了一次,这次竟然毛细管掉了出来,尽管老鼠的眼角血流如注,但流到离心管里的血却是少之又少,不过好在离心后血浆和血细胞分离得挺好,也是个安慰吧。
注意事项:
1.乙醚多放,但不是越多越好,注意不要让蒸气把自己迷晕了;
2.抓老鼠时要张大手掌紧紧地抓住它,使手掌整个包住老鼠身子,不要怕,使劲扔进乙醚瓶中,迅速盖上盖子;
3.多麻醉一会;
4.毛细管要充分浸润肝素,离心管要充分浸润肝素,保证毛细管是湿润状态,离心管要充分浸润肝素后将肝素倒回,尽量不要残留太多肝素,以免影响测定;
5.趁老鼠昏迷时迅速将蘸了肝素的毛细管迅速扎入眼角,扎入时边旋转边深入,一定要扎得深,这样才不会掉出来;
6.血流出时要迅速将老鼠掉转,同时用手扶住毛细管(不要让毛细管掉出大鼠眼角,否则血流很难对准离心管,会滴到别处,就白取了),让另外一个同学拿离心管接住血,要对准,接血过程要迅速;
7.血量接够后,将毛细管拔出,用卫生纸擦拭老鼠眼睛;
8.将老鼠放回笼子,迅速盖上盖子,给老鼠换些垫料,放些鼠粮,换些水,安抚一下,要善待动物。
PS:毛细管不要太长也不要太短,大约2、3厘米就差不多了,太长了血会凝在管子里下不来,比较浪费,太短的话不容易向眼角里深入,注意用毛细管的平头那端,不要用掰断的尖头那端。
取血后要迅速地离心,时间长了容易凝血。
第一次做时简直太挫败了,当时手脚冰冷,血也没取出来几滴。也许是一贯太善良了,觉得眼角取血太残忍,总下不去手,还被同组的人嘲笑,令我很窝火,心想反正不做好就毕不了业,心一横就上了。回来好好地总结了一下经验,反复回顾操作过程中的注意事项,同时别人做的时候也多观察,结果今天再取时就很纯熟了,很迅速地就取好了。
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2、你说:“取血后要迅速地离心,时间长了容易凝血”,不老恰当的吧?既然加了肝素抗凝,怎么还会“容易凝血”呢?除非加的量不够或者有别的不合适的地方。
3、毛细管并不是扎的“越深越好”,深浅适中最好,能吃上劲儿不掉下来就行。太深有时候反倒不适宜血液流出来,这时候只要把毛细管稍微往外拔一点点即可。如果你以后经常取血,我相信你会遇到这个问题的。
4、就是动物实验的基本操作问题了。我觉得之所以你感觉这次取血较狼狈,确实是因为你的抓取动物这个基本操作还不过关,更别说还要加之目内眦取血这个操作了。其实就是“稳、准、狠”,说是“狠”其实却效果好,因为只有又快又准又狠,才会在乙醚麻醉醒来之前顺利取完血,才会更大的减轻大鼠的疼痛,这其实也就是一种角度的“善待”呢。总比折腾半天下不去手,乙醚麻醉一会就醒,那时候还没取完,它不是更疼吗?
好了,有了第一次的成功,以后就会越来越顺的。动物实验最好的开始就多上手多练习,实践最重要了。祝你好运!

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一般不用麻醉,同于个眼睛部位至少可以取到5个点,两支眼睛取10个没有问题
做大鼠药动学,不麻醉眼眶采血,每次0.2ml,48小时一只大鼠可采18个点。
实际上无论大鼠还是小鼠采血时都要麻醉的,请你不要说不麻醉采血才是高手。那样对动物是很不人道的。在有些国家你可能会被人家告上法庭的。而且疼痛会对动物产生应激反应,对你的实验结果是有影响的。二氧化碳麻醉的方法是很好的,只需一个气瓶,一个透明塑料箱就可以了。当动物肌张力消失了,很容易就可以采出血来。无论如何,要善待动物,你的实验结果才是最好的。
其实,在GLP实验室做大鼠取血都已经不用内眦取血。主要是麻不麻醉对实验都有影响、还会产生溶血。以后在试验设计时可以考虑每组多设几只鼠。
药剂做药动学一般麻醉的多,药理的学生喜欢直接取血,每次取0.5ml一般可取12~13个点,固定大鼠的方法是让大鼠咬住一个固定点,接血稳定,采血很快。关键问题是规范操作
刚开始学习采血都是这样子的,楼主的经验很宝贵,值得初学者学习。
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乙醚麻醉大概多久可以醒来?
麻醉的量和时间如何掌握呢?
从来都是不麻醉直接取的
我觉得不麻醉一是不人道,二是大鼠因为疼痛可能会释放一些内源性物质和产生应激反应,导致实验结果有偏差。
xiexie
那到底是麻醉好还是不麻醉好呢?说真的,麻醉后肯定好取一些,也人道一些,但是有老师说这样取出的血不是在常态下的,会影响结果。 2 1 2 下一页 尾页