在做溶出度测定时,用HPLC测定,比如溶出度曲线,同一杯里,不同时间点取样,有的时间点会有1个不知道是什么的峰出现,有的时间点又没有,出前莫明峰的出峰时间是一样的,这是什么原因啊?这样的图谱能不能用?期待高手指点
补充:那个莫明峰,不影响主峰
不同的杯呢，是否都是在相似的时间里出现这样的峰？
如果是的话，有没有考虑药物的降解出现的？
出现峰的时间点有规律的么，还是毫无规律？
有规律的话，可有相关的因素？
毫无规律的话，回想一下你的实验操作是否有纰漏之处？
首先非常感谢年的解答.出现峰毫无规律的,连续做了7批曲线,每天1批,前面2批是没有的,后面的5批都会时而出现那样的峰,峰没什么规律的,操作上也没什么不一样,这就是让我最郁闷的地方,这样的数据还能不能用呢?
你按照含量的测定方法,取20片,研磨细,使用溶出液配制实验液,看看那个时间是否出峰.
因为我觉得有可能是溶出液的酸碱性导致了主药的分解,出现了杂峰(降解物质).
此外最好是有图谱看看,是否是气泡峰,或者是你的HPLC系统和试验器具不清洁被污染出的峰.
我们溶出度溶出介质是水,6个杯,在相同时间点也没有规律,有时候15min出现,有时候是30min,等,不会6个杯都同时出现
补充:峰是时而大时而小
出的峰峰形怎么样?理论塔板数和拖尾因子如何?用的是哪个品牌的HPLC,配自动进样器?
理论板数:7539 托尾因子:0.825 岛津的HPLC,使用的是手动进样器
峰形不是很好,再次感谢您的帮助
托尾因子:0.825 ,那就是有峰前沿的现象?前沿的厉害吗?
我个人认为,这些图谱不适合作为申报资料的.
前两年,我使用岛津的HPLC,配自动进样器做曲线测定的时候,也出现过峰形的问题(概率很小大概每400针出现一针),当时联合厂家进行调查的结果,是认为自动进样器的问题.
主峰的拖尾因子是1.059,那个峰前沿还是比较明显的,我也在考虑重新做那几批曲线,但之前的那根柱子已经不行了,换另1个厂家的同样是C18柱,可以吗?还有,那几批曲线要放在10#质量研究里的.期待您的帮助,
测定曲线最好使用新柱子,当时我们实验室该型号的柱子有十根,平均20天就换一根新的,当然不是换了才用,就是保证柱子不出问题.使用寿命快到的柱子做,肯定会出一些问题.
你需要换柱子的话,出峰时间会不会因此有较大改变?
是的,原先的柱子主峰是7.278出峰,换1根也是C18柱另外厂家的主峰是5.874出峰,做曲线之前已经做过溶出度线性,回收率,溶液稳定性实验了,对了,在含量测定还做了耐用性实验的,可以换根柱子做吗?谢谢
就是分析方法验证的时候就做了不同柱子的比较实验(耐用性和精密度)?
假如做了的话,就可以换,如果没有做,就不该换,因为没有经过验证的分析方法去分析是站不住脚的.
含量测定那做了不同柱子的耐用性实验的,这样的话溶出度曲线测定就可以换根柱子做了吧?非常感谢您的帮助.
溶出度的分析方法验证没有做不同柱子?那样的话,我觉得应该不行的.
不知道其他有经验的朋友,有没有其他看法?
再次请教,溶出度不同柱子的耐用性实验,是做1次溶出度6个杯,用不同厂家的柱子测定就可以了吗?
实际上不是这样,这个不叫耐用性试验,
使用不同的柱子,这个应该在精密度这样项目上体现出,即不同的分析人员使用不同的柱子,连续测定6天样品(双样),得到12个数据,比较回收率和RSD%,在合格范围内,说明柱子的型号对样品的测定没有影响.
耐用性主要还是在流速、温度和流动相的pH这些方面做微调，考察这些改变对样品的测试的影响。
以上都是我个人的观点，难免有错的地方，也希望其他朋友能一起参与讨论，谢谢。
看来我的这个问题比较棘手啊,希望各位前辈能来指点,谢谢
怎么没人来讨论呢???
人气不足啊.
再次请教:换了同1厂家同1型号的C18柱,出峰时间有点差异,由来的是7.238,现在的是6.884,柱子的半峰宽也要小,峰高也要高些,可以看出的用另1根柱子做的,这样可以吗?
期待大家的帮助
同1厂家同1型号的C18柱做没有关系,最好标明色谱柱的序列号,以示区别.
非常感谢您的帮助,就是要在申报资料里标明吗?还是在实验原始记录里标明就可以了?
实验原始记录里标明就可以了,不客气.
对了,峰面积也有点不一样,原来的有17万多,现在的只有近16万了,不会有影响吗?
补充:今天做了1批溶出度曲线,现在60分钟的峰面积只有以前45分钟时候的,相同浓度对照溶液的峰面积也比之前的要小
不过最后计算出来的结果是一样的
不同的柱子总是有点不同的,没关系.
在做溶出度测定时,用HPLC测定,比如溶出度曲线,同一杯里,不同时间点取样,有的时间点会有1个不知道是什么的峰出现,有的时间点又没有,出前莫明峰的出峰时间是一样的,这是什么原因啊?这样的图谱能不能用?期待高手指点
我遇到过类似的问题，我做的事一个中药复方品种，分析原因是主峰跑完后，还有其它成分保留时间比主峰长，滞留在色谱柱内，到第二针再出峰而对下面的色谱峰产生干扰，不知楼主是复方产品否？？？？
是复方的，您说的情况我也有考虑过，进完1针后 让它跑了很长时间，也没有什么峰出现，重要的是出现那个峰是没什么规律的，之前有做过2批曲线的，都没有出现那个峰，应该不会是滞留下来的
你跑了很长时间，是多长时间呀，我有次做高效也是也是这样，有的样品出现奇怪的锋，后来发现是前一个样品的锋还没出完，每次都要等45min钟后才好进下一针。
补充:那个莫明峰,不影响主峰
不同的杯呢，是否都是在相似的时间里出现这样的峰？
如果是的话，有没有考虑药物的降解出现的？
出现峰的时间点有规律的么，还是毫无规律？
有规律的话，可有相关的因素？
毫无规律的话，回想一下你的实验操作是否有纰漏之处？
首先非常感谢年的解答.出现峰毫无规律的,连续做了7批曲线,每天1批,前面2批是没有的,后面的5批都会时而出现那样的峰,峰没什么规律的,操作上也没什么不一样,这就是让我最郁闷的地方,这样的数据还能不能用呢?
你按照含量的测定方法,取20片,研磨细,使用溶出液配制实验液,看看那个时间是否出峰.
因为我觉得有可能是溶出液的酸碱性导致了主药的分解,出现了杂峰(降解物质).
此外最好是有图谱看看,是否是气泡峰,或者是你的HPLC系统和试验器具不清洁被污染出的峰.
我们溶出度溶出介质是水,6个杯,在相同时间点也没有规律,有时候15min出现,有时候是30min,等,不会6个杯都同时出现
补充:峰是时而大时而小
出的峰峰形怎么样?理论塔板数和拖尾因子如何?用的是哪个品牌的HPLC,配自动进样器?
理论板数:7539 托尾因子:0.825 岛津的HPLC,使用的是手动进样器
峰形不是很好,再次感谢您的帮助
托尾因子:0.825 ,那就是有峰前沿的现象?前沿的厉害吗?
我个人认为,这些图谱不适合作为申报资料的.
前两年,我使用岛津的HPLC,配自动进样器做曲线测定的时候,也出现过峰形的问题(概率很小大概每400针出现一针),当时联合厂家进行调查的结果,是认为自动进样器的问题.
主峰的拖尾因子是1.059,那个峰前沿还是比较明显的,我也在考虑重新做那几批曲线,但之前的那根柱子已经不行了,换另1个厂家的同样是C18柱,可以吗?还有,那几批曲线要放在10#质量研究里的.期待您的帮助,
测定曲线最好使用新柱子,当时我们实验室该型号的柱子有十根,平均20天就换一根新的,当然不是换了才用,就是保证柱子不出问题.使用寿命快到的柱子做,肯定会出一些问题.
你需要换柱子的话,出峰时间会不会因此有较大改变?
是的,原先的柱子主峰是7.278出峰,换1根也是C18柱另外厂家的主峰是5.874出峰,做曲线之前已经做过溶出度线性,回收率,溶液稳定性实验了,对了,在含量测定还做了耐用性实验的,可以换根柱子做吗?谢谢
就是分析方法验证的时候就做了不同柱子的比较实验(耐用性和精密度)?
假如做了的话,就可以换,如果没有做,就不该换,因为没有经过验证的分析方法去分析是站不住脚的.
含量测定那做了不同柱子的耐用性实验的,这样的话溶出度曲线测定就可以换根柱子做了吧?非常感谢您的帮助.
溶出度的分析方法验证没有做不同柱子?那样的话,我觉得应该不行的.
不知道其他有经验的朋友,有没有其他看法?
再次请教,溶出度不同柱子的耐用性实验,是做1次溶出度6个杯,用不同厂家的柱子测定就可以了吗?
实际上不是这样,这个不叫耐用性试验,
使用不同的柱子,这个应该在精密度这样项目上体现出,即不同的分析人员使用不同的柱子,连续测定6天样品(双样),得到12个数据,比较回收率和RSD%,在合格范围内,说明柱子的型号对样品的测定没有影响.
耐用性主要还是在流速、温度和流动相的pH这些方面做微调，考察这些改变对样品的测试的影响。
以上都是我个人的观点，难免有错的地方，也希望其他朋友能一起参与讨论，谢谢。
看来我的这个问题比较棘手啊,希望各位前辈能来指点,谢谢
怎么没人来讨论呢???
人气不足啊.
再次请教:换了同1厂家同1型号的C18柱,出峰时间有点差异,由来的是7.238,现在的是6.884,柱子的半峰宽也要小,峰高也要高些,可以看出的用另1根柱子做的,这样可以吗?
期待大家的帮助
同1厂家同1型号的C18柱做没有关系,最好标明色谱柱的序列号,以示区别.
非常感谢您的帮助,就是要在申报资料里标明吗?还是在实验原始记录里标明就可以了?
实验原始记录里标明就可以了,不客气.
对了,峰面积也有点不一样,原来的有17万多,现在的只有近16万了,不会有影响吗?
补充:今天做了1批溶出度曲线,现在60分钟的峰面积只有以前45分钟时候的,相同浓度对照溶液的峰面积也比之前的要小
不过最后计算出来的结果是一样的
不同的柱子总是有点不同的,没关系.
在做溶出度测定时,用HPLC测定,比如溶出度曲线,同一杯里,不同时间点取样,有的时间点会有1个不知道是什么的峰出现,有的时间点又没有,出前莫明峰的出峰时间是一样的,这是什么原因啊?这样的图谱能不能用?期待高手指点
我遇到过类似的问题，我做的事一个中药复方品种，分析原因是主峰跑完后，还有其它成分保留时间比主峰长，滞留在色谱柱内，到第二针再出峰而对下面的色谱峰产生干扰，不知楼主是复方产品否？？？？
是复方的，您说的情况我也有考虑过，进完1针后 让它跑了很长时间，也没有什么峰出现，重要的是出现那个峰是没什么规律的，之前有做过2批曲线的，都没有出现那个峰，应该不会是滞留下来的
你跑了很长时间，是多长时间呀，我有次做高效也是也是这样，有的样品出现奇怪的锋，后来发现是前一个样品的锋还没出完，每次都要等45min钟后才好进下一针。