我现在有个类似的项目，标准品不能确保提供，想通过校正因子来计算杂质含量。查找了论坛上一些相关的帖子，有些问题想请教。

我的理解是分别就主药和杂质做两条线性，而两条线性的浓度范围是一样的，都是根据（杂质限度*样品浓度）展开的。我现在假设杂质的响应因子很小，只有主药的1/10，那杂质在这个浓度范围很可能不成线性了，那这时该怎么办？我能想到的办法有以下几个:

1、改变检测波长，使杂质的响应因子增大，和主药响应因子接近。这时如果两者的相应因子都较大，在当前样品浓度下都能成线性那就最好；如果两者响应因子都较小，很难在当前样品浓度下成线性，那就考虑提高样品浓度。

因为样品里还有其他很多杂质，如果改变波长的话其实就是把这个杂质的单独考察了。

2、单纯提高样品的进样浓度，使得浓度范围增大，从而使杂质在这个浓度范围内成线性。但是样品浓度过大可能不利于杂质分离。

另外，假设我现在的杂质对照品只够测校正因子，那我验证杂质测定方法的时候可以拿主药对照品来做吗？比如样品浓度是1mg/ml，限度是0.1%，杂质相对主药的校正因子是1/10，那这个时候拿主药对照品来验证杂质测定方法的话，对照浓度是用1ug/ml还是0.1ug/ml？

请大家指教一下，这些问题一直困扰着我，谢谢~




1. 或者2. 都是：先试了，有结果再说下一步。

毕竟，我们的目的是要解决问题，穷尽所有方法的去解决问题，搞清楚产品是否安全。

至于该付出什么样的成本、怎样去实现他们，这个正是科研人员的责任。




嗯，皮蛋兄的意思就是我帖子里写的对于怎样测定校正因子的理解和做法都是合理的？

还有那个最后附加的问题，假设我现在的杂质对照品只够测校正因子，那我验证杂质测定方法的时候可以拿主药对照品来做吗？比如样品浓度是1mg/ml，限度是0.1%，杂质相对主药的校正因子是1/10，那这个时候拿主药对照品来验证杂质测定方法的话，对照浓度是用1ug/ml还是0.1ug/ml？还是说只能用杂质对照品做验证？这个地方希望能指教下~




按照中国药典2010年版的附录计算校正因子，如果校正因子大于5，最好使用杂质对照品外标法。以保证定量的准确性。杂质对照品不能确保提供，这个问题唯一解决途径就是买和制备，cde估计是不会放过你的。





校正因子大于5，哪里有详细规定？能不能给个链接或资料名，谢谢云栈洞中战友




CDE电子期刊：色谱法在药品研发中的应用及常见问题分析




有几个已知杂质啊，相对响应因子这么小，说明方法当初选择有关物质检测波长时，是不是有问题呢。有关物质波长选择时要兼顾杂质吸收的。是不是要考虑有关物质检测波长选择的合理性呢。还真没见过相对响应因子这么小的。




“另外，假设我现在的杂质对照品只够测校正因子，那我验证杂质测定方法的时候可以拿主药对照品来做吗？比如样品浓度是1mg/ml，限度是0.1%，杂质相对主药的校正因子是1/10，那这个时候拿主药对照品来验证杂质测定方法的话，对照浓度是用1ug/ml还是0.1ug/ml？”
对于此问题我感觉应该用0.10ug/ml的主药的浓度，因为这个浓度下的峰面积才相当于杂质的限量峰面积，才有比较性。
当然如果响应因子为0.5以上，我还是会采用1ug/ml的对照品浓度