“流动相比例变化±5％”，该怎么理解？
1、以有机相：水相=50:50为例，改变后是45:55，还是47.5:52.5？
2、改变后如果比例已经不合适，是不是要缩小变化范围？




其实耐用性的参数变化范围不需要那么教条，要根据你的实际情况来选择，如果你原来的分离度就刚刚达到2，当然不适合过大的调动流动相比例。如LZ的例子，用47:53就可以了，如果45:55适合的话也可以。
如果比例微调后不适合了，我觉得也无需再缩小了，但需特别注明该方法对流动相比例比较敏感，对比例要严格控制。
个人看法，还请多多指教。





先把教条吃透了，再灵活运用。




这个耐用性试验没有楼主说的这么死板的。个人觉得二楼的观点就很好




《 含量测定分析方法验证的可接受标准简介》中耐用性试验，分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、流速相对值变化±20％时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离；各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%。
1、流动相比例变化±5％。我们做的是水相变化±5％，或者有机相变化±5％。如水相：有机相=40:60，耐用性试验则做水相：有机相=42:58，水相：有机相=38:62，或者水相：有机相=37:63，水相：有机相=43:57。你的水相：有机相=50:50，无论变哪相都是水相：有机相=47.5:52.5和水相：有机相=52.5:47.5。
2、你所说的比例不合适是什么意思？是指结果超出可接受标准吗？考察项和可接受标准在《 含量测定分析方法验证的可接受标准简介》中已经很明确，如果随意改动，在申报的时候将徒增不必要的麻烦和风险。