各位大侠：大家好，小弟现有一问题急需解决，望有大家给点建议，帮我解决一下，先谢过。
问题如下：
现按2005版药典检测氨苄西林有关物质，方法如下
结果空白做出来就很多峰，见图
考虑怕是柱子原因，我们换了个新柱子，结果比原来的好点，但是还是有好多峰，如下
现在真的不知道怎么做了，我看40分钟到50分钟的峰多，就用100%的B冲系统，结果基线很平，没有峰，但是开始走梯度就又出来了。
仪器会有这么大的影响吗？还是流动相变动大？盐和酸都是分析级的，水是纯净水，问题太多，望指教。
这就是梯度的固有毛病，换什么没法完全消除，有超纯水会好一点，杂峰会少一点，但基线是一定会飘的，这一点相信你能想明白。
飘我认可，但是峰就不通过了
我觉得图上的几个大点的峰应该会解决的，但是我不知道怎么做，大家给点操作的方法和意见，我去给验证，结果会及时贴上来
0.2mol/L写错了吧，是不是0.02呢？
如果各个物质都与空白峰不重合，就不要去管它了，积分时扣除空白就行。
0.2mol/L没写错，空白溶剂应该没有这么大
估计是水或乙腈的问题，换娃哈哈纯净水先试以下。
先多洗几次进样针，有可能是进样针被污染了。
再试试将进样量设为0，空走一个梯度看看，如果图谱还是这个样子，那就可能是流动相的问题了。
用洗液洗涤所有要用的仪器,操作过程仔细一点,流动相新配新用
水也用重新蒸馏出的水,效果就会好点
我也遇到过这种问题,不是操作的原因,CH3OH由30-70,后面的梯度峰就是除不掉!后来把梯度调缓了,变成50-80,梯度峰就没了.但我还是想不通,为什么梯度峰会那么大?
这个用什么检测器的..
谢谢各位给我的指导，现在已经有点成绩了。现初步认定是流动相问题。但是还是达不到完全去除。等做好后和大家探讨原因。
操作方法问题
关注中.....
1，建议试试renfuyaoye说的，换换市售500ml娃哈哈纯净水试验；
2，可能检测器有残留物质，清洗检测池；
3，可能色谱柱有残留物质，若有条件，换新柱试试；
4，如有保护柱，可能保护柱被污染，若有条件，换新保护柱或去掉保护柱试试；
5，不知楼主用的是什么仪器？岛津？安捷伦？Waters？如有条件，请更换性能更好的仪器对比验证或委托别的单位重复条件；
6，还有个原因，那就是梯度程序不合理，但你列举的是药典方法，经查询05版二部该药物安捷伦仪器检验的图谱显示，并无楼主所说的现象（见附图），所以很有可能是上面的原因，请一一核实；
7，这个问题，在药品申报中药检所老师也曾经提到过，梯度峰不应该有那么多尖锐的色谱峰出现，否则很难通过审评，试试上面的建议；
期待楼主结果反馈......
暂置顶讨论
首先感谢这些天版主帮我把帖子置顶讨论，同时也谢谢大家给的建议和帮助。
我看了小药丸的图谱，在图中发现40~50分钟阶段同样也有峰出现，具体的说是两个。这与我做的结果很相象。
下面说我的结果，希望能给大家一点经验，在以后的工作中能对别人有所帮助。
所用物品：娃哈哈纯净水、优级磷酸盐、进口乙腈
实验1、采用空白实验，这里的空白实验是我自己设计
，并不是样品空白实验。方法：只采用水和乙腈按流动相比例配置，结果见图
同样出现了峰，这就是一个问题。然后我做了样品
可以看出，40~60分钟是有峰出现的。
上面的版主提到了梯度程序问题，下面我对这个梯度程序的理解说一下看法。个人感觉梯度程序设计的很合理，0~10分钟出主峰，10~40出杂质，40~50冲出多余的成分（这的成分指的是水中或盐中的杂质），50~60平衡。问题出现的原因：水中和盐中有杂质。分析：由于水中有杂质存在，这些杂质在乙腈比例小的情况下，保留在色谱柱中，在后面流动相变化中乙腈比例加大，积攒的杂质同时流出，产生了色谱峰。
现改用注射用水对实验进行验证。估计能搞定
谢谢及时反馈试验结果，参考－－药学讨论区管理规定（试行）071024
第十条 求助者在获得应助后，应回应致谢，尤其应反馈该问题最终的解决方法、并更改标题的【求助】主题词为【解决】。按照上述方式反馈、并积极参与讨论的求助者，版主可视其反馈情况和参与程度予以加分鼓励。
给予加分鼓励
第十条 求助者在获得应助后，应回应致谢，尤其应反馈该问题最终的解决方法、并更改标题的【求助】主题词为【解决】。
现已更正。最后我还要把我做的最好的实验结果和大家分享，我会尽快 2 1 2 下一页 尾页
问题如下：
现按2005版药典检测氨苄西林有关物质，方法如下
结果空白做出来就很多峰，见图
考虑怕是柱子原因，我们换了个新柱子，结果比原来的好点，但是还是有好多峰，如下
现在真的不知道怎么做了，我看40分钟到50分钟的峰多，就用100%的B冲系统，结果基线很平，没有峰，但是开始走梯度就又出来了。
仪器会有这么大的影响吗？还是流动相变动大？盐和酸都是分析级的，水是纯净水，问题太多，望指教。
这就是梯度的固有毛病，换什么没法完全消除，有超纯水会好一点，杂峰会少一点，但基线是一定会飘的，这一点相信你能想明白。
飘我认可，但是峰就不通过了
我觉得图上的几个大点的峰应该会解决的，但是我不知道怎么做，大家给点操作的方法和意见，我去给验证，结果会及时贴上来
0.2mol/L写错了吧，是不是0.02呢？
如果各个物质都与空白峰不重合，就不要去管它了，积分时扣除空白就行。
0.2mol/L没写错，空白溶剂应该没有这么大
估计是水或乙腈的问题，换娃哈哈纯净水先试以下。
先多洗几次进样针，有可能是进样针被污染了。
再试试将进样量设为0，空走一个梯度看看，如果图谱还是这个样子，那就可能是流动相的问题了。
用洗液洗涤所有要用的仪器,操作过程仔细一点,流动相新配新用
水也用重新蒸馏出的水,效果就会好点
我也遇到过这种问题,不是操作的原因,CH3OH由30-70,后面的梯度峰就是除不掉!后来把梯度调缓了,变成50-80,梯度峰就没了.但我还是想不通,为什么梯度峰会那么大?
这个用什么检测器的..
谢谢各位给我的指导，现在已经有点成绩了。现初步认定是流动相问题。但是还是达不到完全去除。等做好后和大家探讨原因。
操作方法问题
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1，建议试试renfuyaoye说的，换换市售500ml娃哈哈纯净水试验；
2，可能检测器有残留物质，清洗检测池；
3，可能色谱柱有残留物质，若有条件，换新柱试试；
4，如有保护柱，可能保护柱被污染，若有条件，换新保护柱或去掉保护柱试试；
5，不知楼主用的是什么仪器？岛津？安捷伦？Waters？如有条件，请更换性能更好的仪器对比验证或委托别的单位重复条件；
6，还有个原因，那就是梯度程序不合理，但你列举的是药典方法，经查询05版二部该药物安捷伦仪器检验的图谱显示，并无楼主所说的现象（见附图），所以很有可能是上面的原因，请一一核实；
7，这个问题，在药品申报中药检所老师也曾经提到过，梯度峰不应该有那么多尖锐的色谱峰出现，否则很难通过审评，试试上面的建议；
期待楼主结果反馈......
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首先感谢这些天版主帮我把帖子置顶讨论，同时也谢谢大家给的建议和帮助。
我看了小药丸的图谱，在图中发现40~50分钟阶段同样也有峰出现，具体的说是两个。这与我做的结果很相象。
下面说我的结果，希望能给大家一点经验，在以后的工作中能对别人有所帮助。
所用物品：娃哈哈纯净水、优级磷酸盐、进口乙腈
实验1、采用空白实验，这里的空白实验是我自己设计
，并不是样品空白实验。方法：只采用水和乙腈按流动相比例配置，结果见图同样出现了峰，这就是一个问题。然后我做了样品
可以看出，40~60分钟是有峰出现的。
上面的版主提到了梯度程序问题，下面我对这个梯度程序的理解说一下看法。个人感觉梯度程序设计的很合理，0~10分钟出主峰，10~40出杂质，40~50冲出多余的成分（这的成分指的是水中或盐中的杂质），50~60平衡。问题出现的原因：水中和盐中有杂质。分析：由于水中有杂质存在，这些杂质在乙腈比例小的情况下，保留在色谱柱中，在后面流动相变化中乙腈比例加大，积攒的杂质同时流出，产生了色谱峰。
现改用注射用水对实验进行验证。估计能搞定
谢谢及时反馈试验结果，参考－－药学讨论区管理规定（试行）071024
第十条 求助者在获得应助后，应回应致谢，尤其应反馈该问题最终的解决方法、并更改标题的【求助】主题词为【解决】。按照上述方式反馈、并积极参与讨论的求助者，版主可视其反馈情况和参与程度予以加分鼓励。
给予加分鼓励
第十条 求助者在获得应助后，应回应致谢，尤其应反馈该问题最终的解决方法、并更改标题的【求助】主题词为【解决】。
现已更正。最后我还要把我做的最好的实验结果和大家分享，我会尽快 2 1 2 下一页 尾页