有人作过用反向填料装柱分离极性大的物质么，请问有什么注意事项？具体操作要点是什么呢？
反向填料是不是只有C18呢？
反相C18分离极性大的物质一般是很适用的方法。
注意的问题：
1，样品的溶解性，最好样品能够小体积的流动相溶解，如果不行看这个贴



2，注意上样量。

3，注意C18的处理＆使用方法，以免破坏填料；样品尽量纯度高点，否则对填料污染很严重

4，C18的流速很慢，如果有条件最好用中压这层析；

5，流动相一般是不同比例的甲醇水，可以根据样品的性质适当加点酸（冰乙酸）；不要用纯水洗脱C18填料，一般的填料不耐水。

操作要点和正相硅胶差不多。只是使用流动相上的差别。

反相填料除了C18外，一般的凝胶也做为反相使用。
补充：上柱前先通过反相板摸条件；过滤
反相填料根据碳链的长短有C18、C8、C4等。
碳链越短越适合分离极性大的化合物。