各位神虫们, 请教大家一个问题:我最近过硅胶柱子遇到两个问题:
1、想要分的点和原点离得挺远,第一个点下来的同时原点都下来了,理论上点不是应该梯度下来的吗?想问问大家有没有遇到过这种情况,应该怎么解释?
2、再有一个就是有个点用氯仿:甲醇(10:1)跑,在薄层上目标点Rf在0.2-0.3之间,其他点均压在原点,按理说应该很好分,可是最后还是目标点和原点一起下来了。期间有换成6:1的梯度洗脱了一段时间,可是6:1的也是能将其他点压在原点的。请问大家如何解释呢?
你的展开剂,和显色剂 选的恰当吗 我以前做过甙元类成分,就出现过类似的情况,后来自己重新摸索的展开条件,你要是把成分类型以及大概极性写明,别人可能会给你提供有效的建议
硅胶径高比大概多少?第一个点不是要分的点吧?硅胶柱是正相分离,由极性大小先后洗脱下来,楼主说的原点是指所有成分吗?原点都下来了楼主是想描述用甲醇洗柱子的那种情况吗?
硅胶柱跑柱与薄层板跑板不同,一个往下跑一个往上跑,你薄层板跑的够长也会有其他成分跑上去,要根据Rf的差值来看,期间换6:1的跑柱,能将其他成分压在原点?不太明白楼主的意思
我也出现过这种情况,估计是柱子没有装好,或者是洗脱剂配的不准确或者是含水等~而且可以试着在降低下极性看看呢~
我也遇到过这种情况的 我的是在原点的东西量比较大 跑板有Rf值的东西量少 而且跑硅胶柱子是个不断吸附解吸附的过程 这样要是较长时间充柱子 原点的东西也是会被充下来的 跑柱子出现有交叠的部分是不可避免的
展开剂的极性太大,放大十倍试试
呵呵,问题不大,首先是你用的TLC是自己铺的还是商品化的?这个很是关键!商品化的因为效果好,所以再上硅胶柱时需要适当降低极性的!再有,你用的硅胶的规格也很是关键,是用薄层的还是300-400目的?最后,装柱子的时候是干法还是湿法?如果是干法,请问您是否减压抽实?以上是跑柱子的基本经验和操作,点拨一二,望君有所获!小小硅胶柱蕴藏大学问,以小窥大,代表了你们实验室的分离水平!
呵呵 估计是极性大了 等于直接洗柱子了
展开剂还涉及溶解性的问题,如果其他看起来都很OK了,原点在氯仿中的溶解度很高那还是一样一起下来。
换展开剂吧
样品层的厚度也会有影响
1、想要分的点和原点离得挺远,第一个点下来的同时原点都下来了,理论上点不是应该梯度下来的吗?想问问大家有没有遇到过这种情况,应该怎么解释?
2、再有一个就是有个点用氯仿:甲醇(10:1)跑,在薄层上目标点Rf在0.2-0.3之间,其他点均压在原点,按理说应该很好分,可是最后还是目标点和原点一起下来了。期间有换成6:1的梯度洗脱了一段时间,可是6:1的也是能将其他点压在原点的。请问大家如何解释呢?
你的展开剂,和显色剂 选的恰当吗 我以前做过甙元类成分,就出现过类似的情况,后来自己重新摸索的展开条件,你要是把成分类型以及大概极性写明,别人可能会给你提供有效的建议
硅胶径高比大概多少?第一个点不是要分的点吧?硅胶柱是正相分离,由极性大小先后洗脱下来,楼主说的原点是指所有成分吗?原点都下来了楼主是想描述用甲醇洗柱子的那种情况吗?
硅胶柱跑柱与薄层板跑板不同,一个往下跑一个往上跑,你薄层板跑的够长也会有其他成分跑上去,要根据Rf的差值来看,期间换6:1的跑柱,能将其他成分压在原点?不太明白楼主的意思
我也出现过这种情况,估计是柱子没有装好,或者是洗脱剂配的不准确或者是含水等~而且可以试着在降低下极性看看呢~
我也遇到过这种情况的 我的是在原点的东西量比较大 跑板有Rf值的东西量少 而且跑硅胶柱子是个不断吸附解吸附的过程 这样要是较长时间充柱子 原点的东西也是会被充下来的 跑柱子出现有交叠的部分是不可避免的
展开剂的极性太大,放大十倍试试
呵呵,问题不大,首先是你用的TLC是自己铺的还是商品化的?这个很是关键!商品化的因为效果好,所以再上硅胶柱时需要适当降低极性的!再有,你用的硅胶的规格也很是关键,是用薄层的还是300-400目的?最后,装柱子的时候是干法还是湿法?如果是干法,请问您是否减压抽实?以上是跑柱子的基本经验和操作,点拨一二,望君有所获!小小硅胶柱蕴藏大学问,以小窥大,代表了你们实验室的分离水平!
呵呵 估计是极性大了 等于直接洗柱子了
展开剂还涉及溶解性的问题,如果其他看起来都很OK了,原点在氯仿中的溶解度很高那还是一样一起下来。
换展开剂吧
样品层的厚度也会有影响