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如何用液质确定粗提物中未知化合物?急求~

时间: 2012-06-27 21:57:16 作者: 来源: 字号:
大家好,我是新手,所以我的问题要是有不对的地方敬请谅解!
是这样的,我的研究材料是一种植物,试验要求对它有个特殊的处理,然后找出处理前后二者之间成分的差异,所以我用不同溶剂同时对两种材料的粗提物进行了萃取,比如说其中的氯仿层,我要找出处理前后两者在氯仿层是否存在差异物质,想采用LC-MS来分析差异性(能找出具体差异的物质结构和含量的变化),我就是想请教您在不知道具体氯仿层具体含有哪些成分的前提下,怎么去建立LC-MS的分析方法才能最真实、全面的反应目标材料的成分,像我这种,要用哪种电离方式的质谱会比较好呢。
另外我的主要目的是找出材料在处理前后之间的成分差异,要是在液相上分离的效果不好(有很多很明显的峰叠在一起),而恰巧差异是在这个保留时间段,该如何处理这种情况。如果顺利的在图谱上找出差异物质的存在,那可不可以利用液质把差异物质制备出来,因为下一步我想知道差异物质是否有药效作用。

你萃取后的差异物不就是萃取后剩下的水层吗,你何必弄的这么复杂。直接用不同溶剂萃取,都做活性,不就能对比了吗,选择活性最好的做液质定性,很传统的方法


,我可能有个地方没有说清楚,其实在做定性之前,我是做过活性的,就是说用不同溶剂萃取(处理前后植物提取物的两个乙酸乙酯层、氯仿层、正丁醇层) 将各个萃取层的两个不同材料来源做活性比较,如果那一层的活性比较有差异的话,我就做下一步的液质定性,如果二者没有活性差异的话,就不做了。
我问的就是如果氯仿层有活性差异,我改如何针对氯仿层来做液质定性,简而言之就是想知道氯仿层有哪些物质。

那你就得查阅你这个植物的相关化学成分文献,选择一个合适的条件做液质。如果在液相上分离不好作出来的液质是没有意义的,只能将条件摸好点,让指纹图谱上的化合物都分开。现在的液相分离能力已经很先进了,作出一个好的指纹图谱估计问题不大


因为没有经过过多的分离萃取步骤,只是将水提物直接用指定溶剂萃取,而且文献也不好查的,我可不可以就针对未知物质溶于氯仿层(生物碱)或乙酸乙酯层(酚类)这一性质来建立条件呢?要是这样可以的话,那是不是可能会导致未知的活性成分分离不出来呢?

首先,貌似你不知道有机溶剂提取液中有哪些物质,LC-MS做定量和结构鉴定的条件是你在已知是哪些物质的前提下可以做。如果峰分离好的话就可以用制备液相来分离纯化物质,制备液相收集的物质必须达到mg级才可以做结构鉴定,纯度大于90%,才能来做结构鉴定,建议你做下NMR,或者NMR-LC-MS。呵呵,价格不会很便宜的。液相分离不好,是要进行条件摸索的,比如改变流动相比例,在流动相中添加其他试剂改变酸碱度,再就是柱子的长短、型号,流动相的流速等,需要花时间摸索。

先把氯仿粗提物用柱子先分成几个馏分,再上液质摸索条件力争把峰都分开。感觉粗提物直接上不太可靠,峰太多了。

赞成七楼的看法。你先把氯仿层过柱子,分成几部分收集流液,点板合瓶相似成分,最后把这几部分(每部分TLC大概四五个点)进液相摸索条件,条件摸索好后再用这个条件做液质。
液相摸索条件:⑴参考相关文献,⑵自己尝试,要求成分全出来,分离度高,峰形好等

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