过去上硅胶柱均用的是氯仿-甲醇体系，装柱用氯仿。今年要分离大极性的黄酮苷，氯甲体系就拖尾严重了。看论坛上好多人说用氯仿-甲醇-水体系分离效果不错，这个体系冲柱子的话该用什么溶剂装柱呢？是用氯仿装柱呢，还是直接用氯仿-甲醇-水的洗脱液装柱呢？
我们学院从没人用过三相体系，现在是焦急万分啊只能求大家帮忙了%>_<%

黄酮类物质呈酸性，即便是苷元如果不加酸跑的话，也拖尾。因此，加酸是为了防拖尾。所以用硅胶柱纯化黄酮苷都是加酸跑的柱子。氯仿-甲醇-酸体系即可，你的加水体系是不合适的，不会解决拖尾问题的。
至于怎样装柱子，其实你可以用氯仿甲醇特定比例溶胀硅胶，然后直接装柱，跑柱子的时候，新流动相里加特定比例的酸。只要是三相体系的流动相，均不建议梯度洗脱。所以跑柱子前，最好摸好薄层条件。
有什么问题欢迎随时交流。


有没有什么加酸的经典比例呢？我回去摸摸条件


这个比例是看薄层确定的，已能成点为宜，太多的酸，会是黄酮苷水解掉。

最好用聚酰胺 和 LH20分