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【求助】过柱子洗脱问题

时间: 2012-05-23 13:00:09 作者: 来源: 字号:
想过硅胶柱子,物质的极性比较大,用氯仿-甲醇-水 8:2:0.2的比例洗脱,上样之前可以用这个比例淋洗柱子吗

硅胶柱可以用水吗?极性大用ODS

帮忙顶。自己上柱子前都没淋洗过,也来学习一下。

不要有水~~~用ODS~~

上样之前可以用这个比例淋洗柱子不是太好。样品容易扩散,最好极性比这个小。

按教材来说,Rf值为0.2-0.3即可上柱洗脱进行分离。你的样品如果是氯仿甲醇80:20:2的比例来洗脱,你的样品的极性很大,是有糖吧,三相系统面临的是回收溶剂比较麻烦的问题。
如果是干法装柱,最好是先用洗脱剂过一下柱子,因为洗脱剂开始接触硅胶的时候放热,如果样品对热敏感,可能会破坏;再就是可以使硅胶柱更均匀。
如果极性很大的样品用反相柱可以试试,比如RP18

上反相柱会比较好点

硅胶不要用水啊!
正相不行用反相吧。

最好不要用水 除了水后是可以的建议上反相


我也是需要分离极性大的物质,需要过RP18但是实验室没有RP18那过非极性或者中等极性大孔树脂可以吗?

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