如题:
我先时用硅胶对粗提物进行粗分,现在得到馏分大大小小上百瓶,可是失败的是,薄层板没有几个是纯的,很多都是一段小条带,请教各位,接下来我该继续用硅胶细分,还是可以用凝胶色谱柱或者大孔树脂之类的东西?到什么时候可以选用呢,谢了!!
是的,我也遇到是这样的分离问题,可以先大孔粗分,再硅胶柱收集几个混合物比较少的,过凝胶。性质很相近分离难,也有直接上凝胶的
上完第一个硅胶大柱子,就直接上凝胶
个人觉得大硅胶柱下来后,跑一下小硅胶柱,再用凝胶柱好一些!
上完大柱子后,先上小的硅胶柱,接近纯的有很明显的主斑点后上凝胶柱效果比较好些
但是你这样损失比较大点,还不如先用凝胶分好断了再过小柱子硅胶会比较好分
过分迷信凝胶不好
凝胶按分子筛和反向原理分离,其实每次的上样量不会太大,所以一般都是点板斑点只有一两个时才会用。或者点板只有一个,但是HPLC上还能看到几个峰时可以试试。洗脱系统合适的话,凝胶是没有死吸附的。不过实际操作时我碰到过好几次上去一个点,流分接出来都是两三个点,实际上就是凝胶不仅把主要斑点富集了,同时也把杂质富集了。
迫切希望大伙能够多多发表看法,关于凝胶柱分离、硅胶柱层析、以及大孔树脂和聚酰胺树脂分离,该怎么选,怎么用,希望能得到大伙的经验传授呀,继续追加金币求学
我先时用硅胶对粗提物进行粗分,现在得到馏分大大小小上百瓶,可是失败的是,薄层板没有几个是纯的,很多都是一段小条带,请教各位,接下来我该继续用硅胶细分,还是可以用凝胶色谱柱或者大孔树脂之类的东西?到什么时候可以选用呢,谢了!!
是的,我也遇到是这样的分离问题,可以先大孔粗分,再硅胶柱收集几个混合物比较少的,过凝胶。性质很相近分离难,也有直接上凝胶的
上完第一个硅胶大柱子,就直接上凝胶
个人觉得大硅胶柱下来后,跑一下小硅胶柱,再用凝胶柱好一些!
上完大柱子后,先上小的硅胶柱,接近纯的有很明显的主斑点后上凝胶柱效果比较好些
但是你这样损失比较大点,还不如先用凝胶分好断了再过小柱子硅胶会比较好分
过分迷信凝胶不好
凝胶按分子筛和反向原理分离,其实每次的上样量不会太大,所以一般都是点板斑点只有一两个时才会用。或者点板只有一个,但是HPLC上还能看到几个峰时可以试试。洗脱系统合适的话,凝胶是没有死吸附的。不过实际操作时我碰到过好几次上去一个点,流分接出来都是两三个点,实际上就是凝胶不仅把主要斑点富集了,同时也把杂质富集了。
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