我在用膜片钳做全细胞记录,采用的是负压抽吸的方法破膜时遇到这样的问题:显微镜下观察细胞状态良好,且易形成高阻封接。随后继续缓慢的抽吸,进行破膜,但每次即将破膜时细胞就掉下来或破膜后的封接电阻很小,无法形成破膜后的高阻封接。(实验用豚鼠心室肌细胞)
特此请教各位,如何解决我的问题。是需要从细胞方面还是我的操作技术上进行改进?
谢谢,赐教。
电极使用前要抛光,细胞的状态要好,形成巨阻封接后破膜时猛吸一下。膜片钳做的顺利的话出数据很快,但学习要有一个过程。
你说形成高阻封接时猛吸破膜,是高阻封接形成时立即猛吸破膜还是等其稳定后再猛吸。我师姐的经验是破膜的过程一定要缓慢,并且她做的也很好,为什么给你的方法相反,请进一步详细赐教。谢谢!
每个人都有不同的手法吧,即然你那已经有人做了,不防学习一下她的方法,另外就是细胞的状态,和她讨论一下,说不准是哪个地方有点小问题。
特此请教各位,如何解决我的问题。是需要从细胞方面还是我的操作技术上进行改进?
谢谢,赐教。
电极使用前要抛光,细胞的状态要好,形成巨阻封接后破膜时猛吸一下。膜片钳做的顺利的话出数据很快,但学习要有一个过程。
你说形成高阻封接时猛吸破膜,是高阻封接形成时立即猛吸破膜还是等其稳定后再猛吸。我师姐的经验是破膜的过程一定要缓慢,并且她做的也很好,为什么给你的方法相反,请进一步详细赐教。谢谢!
每个人都有不同的手法吧,即然你那已经有人做了,不防学习一下她的方法,另外就是细胞的状态,和她讨论一下,说不准是哪个地方有点小问题。