求助各位大虾！！
事实：最近在做A549细胞的阿霉素毒性实验的时候，发现加入MTT后形成的甲瓒很少，但是同样数量的A2780细胞能形成很多的甲瓒。
问题：是不是A549细胞毒性实验不适合选择MTT进行评价？如果不适合的话，有其他的评价方法吗？
有没有考虑过不是MTT的问题而是细胞对药物（阿霉素）敏感性的问题？
同意楼上
MTT检测的是相对细胞数和细胞活力，A549细胞的阿霉素毒性实验应与正常A549细胞比较，而不是与A2780细胞比较，况且毒性试验对细胞活性肯定是有影响的。你肉眼看甲瓒多少也是不可靠的，还是DMSO溶解后490或570 nm下观察吧。
另外，MTT试验由于其重现性差等原因，在国外快不被承认了
MTT法其原理依赖活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶，其酶活越高，甲臜越多，DMSO溶解后颜色越深。不同的细胞其琥珀酸脱氢酶活性不同，所以即便在相同细胞量的基础上，其甲臜颜色也不同。反正都要做阴性孔或空白孔的，因此，不同的细胞株可以改变细胞量来实现实验目的。
其次，MTT其灵敏性低，重复性差，我不建议使用MTT法来进行细胞毒性实验等涉及细胞数量的实验。现在MTT法的升级版，替代版层出不穷，比如CCK-8。该方法在各个指标上都优于MTT，而且试剂盒也不贵，国内碧云天有卖，你可以去看看。
control组48小时镜检细胞已经长满，但是测得的吸光度仍然只有0.4-0.5，求问除了换实验方法，还有什么解决办法吗？谢谢~~
两个层面：
1、如果实验组与对照组的差异明显，用低灵敏的MTT法也能检测出处理前后存在显著差异，那么，OD只有0.4-0.5又有什么关系呢？
2、就操作而言，CCK-8法比MTT法还要简单，而且它对细胞无毒性，这个特点就非常有优势，你不必裂解细胞，而且不同时间可以反复用酶标仪读板。
所以，如果处理前后实验结果差异很明显，你用MTT法是没有任何问题的。但如果差异不是很明显，个人觉得用MTT法的灵敏性偏低，建议使用CCK-8等方法，后者操作更简单，而且可以实时监测，虽然换了一个检测方法，但对操作而言，对成本而言没有太大的影响。
你自己综合考虑吧，呵呵
http://biochemistry.dxy.cn/bbs/thread/18133777?keywords=EdU%20%E7%BB%86%E8%83%9E%E5%A2%9E%E6%AE%96#18133777
事实：最近在做A549细胞的阿霉素毒性实验的时候，发现加入MTT后形成的甲瓒很少，但是同样数量的A2780细胞能形成很多的甲瓒。
问题：是不是A549细胞毒性实验不适合选择MTT进行评价？如果不适合的话，有其他的评价方法吗？
有没有考虑过不是MTT的问题而是细胞对药物（阿霉素）敏感性的问题？
同意楼上
MTT检测的是相对细胞数和细胞活力，A549细胞的阿霉素毒性实验应与正常A549细胞比较，而不是与A2780细胞比较，况且毒性试验对细胞活性肯定是有影响的。你肉眼看甲瓒多少也是不可靠的，还是DMSO溶解后490或570 nm下观察吧。
另外，MTT试验由于其重现性差等原因，在国外快不被承认了
MTT法其原理依赖活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶，其酶活越高，甲臜越多，DMSO溶解后颜色越深。不同的细胞其琥珀酸脱氢酶活性不同，所以即便在相同细胞量的基础上，其甲臜颜色也不同。反正都要做阴性孔或空白孔的，因此，不同的细胞株可以改变细胞量来实现实验目的。
其次，MTT其灵敏性低，重复性差，我不建议使用MTT法来进行细胞毒性实验等涉及细胞数量的实验。现在MTT法的升级版，替代版层出不穷，比如CCK-8。该方法在各个指标上都优于MTT，而且试剂盒也不贵，国内碧云天有卖，你可以去看看。
control组48小时镜检细胞已经长满，但是测得的吸光度仍然只有0.4-0.5，求问除了换实验方法，还有什么解决办法吗？谢谢~~
两个层面：
1、如果实验组与对照组的差异明显，用低灵敏的MTT法也能检测出处理前后存在显著差异，那么，OD只有0.4-0.5又有什么关系呢？
2、就操作而言，CCK-8法比MTT法还要简单，而且它对细胞无毒性，这个特点就非常有优势，你不必裂解细胞，而且不同时间可以反复用酶标仪读板。
所以，如果处理前后实验结果差异很明显，你用MTT法是没有任何问题的。但如果差异不是很明显，个人觉得用MTT法的灵敏性偏低，建议使用CCK-8等方法，后者操作更简单，而且可以实时监测，虽然换了一个检测方法，但对操作而言，对成本而言没有太大的影响。
你自己综合考虑吧，呵呵
http://biochemistry.dxy.cn/bbs/thread/18133777?keywords=EdU%20%E7%BB%86%E8%83%9E%E5%A2%9E%E6%AE%96#18133777