最近做体外抗肿瘤实验，由于我的样品颜色很深，做实验过程中观察细胞形态和个数，发现肿瘤细胞明显减少，即有较好的抗肿瘤活性，但是用酶标仪测样品反应液的吸光度时，发现加样品的组吸光度均大于正常组，与之前观察细胞的结果不符。不知何故。药品溶解度不太好，而且最大吸收为520nm，酶标仪测定时波长为570nm。请高人指点，感激涕零！！！




是用MTT吗？要不你加MTT前轻轻把含药物的培养基吸走再加MTT？你的药物浓度多大啊？怎么会那么深啊？




可以用SRB方法测试，这个也是非常经典的一种方法，不会出现因为药物颜色而导致的读数问题。




MTT有时无法得出准确结果，建议用BrdU或EdU细胞增殖方法检测。
http://biochemistry.dxy.cn/bbs/thread/18133777?keywords=EdU%20%E7%BB%86%E8%83%9E%E5%A2%9E%E6%AE%96#18133777




是用MTT法，浓度40-640ug/ml不等




建议：另设药物颜色对照组，即培养基+不同浓度的药物（但不加细胞），测定后扣除药物的颜色的OD值即可。




根据MTT的原理，有些药物可使MTT还原，尤其中药，导致加药组吸光度偏大。所以建议在加MTT之前，用PBS洗，这样可除去死细胞，并防止药物对OD值的影响。




感谢各位宝贵意见！