关于LPS刺激巨噬细胞

时间: 2012-04-26 04:51:01 作者: 来源: 字号: 大中小

我现在需要进行体外实验，看下药物A对LPS刺激RAW264.7后TNF alpha产生的影响。我是这样想的：
1.铺板RAW264.7细胞
2.次日弃去板内培养液，加入1640+10%FBS稀释的药物
3.1h后加入一定浓度的LPS。现在我就是不清楚大家有做过类似实验的，这一步是怎么处理的？含有药物的培养液不应该弃去，但是LPS怎么加进去？是不是把LPS用完全培养液稀释成一定浓度的等体积液体(与板内旧液体积相同)再加入板孔？
谢谢大家，查阅文献，都是说在给药后若干小时后加入LPS，但是具体操作没说，所以请大家说说自己是怎么做的。
上面培养细胞、加入药物及LPS你们都是在哪种孔板中做的？24还是96？
之后我会转移到384孔板，用Htrf-TNF alpha测，你们呢？ELISA还是Alphalisa？
不胜感激！ Smile

含有药物的培养基不能丢掉。
你可以把LPS浓度配的高一点，然后按照最终浓度加入少量进去即可。LPS你可以就用1640配就行。
培养细胞，加药，加LPS你可以在24或96孔普通细胞培养板子里进行。孵育一段时间后转移10ul上清到384板里，注意这里的384板必须是全白或全黑的板子。

谢谢二楼朋友！！

您好，战友，你的这个 RAW264.7还有吗，能分给我点吗，我最近做实验着急用
QQ:270292856

当然可以，一直在用着呢，不过中秋回来再说好吗？呵呵！我QQ1124706868

真的啊，太感谢了，我加你QQ啊

您好，你是不是叫阿司匹林啊，我加你QQ好友两次，都被你拒绝了