我 的 血管环试验做的 是家兔胸主动脉血管 环。静息张力是2克。平衡2小时。每20分中更换一次克氏液。然后 加NE,5-6分钟达到最大。约是5。5克力。到 开始有下降趋势的 时候，加乙酰胆碱，可是 没有反映啊 ？我已经连续做三次液没有反映！！！急！急！急！！
请问：1乙酰胆碱引起的 舒张是不是很明显？
2请问舒张百分率是怎么计算的 啊 ？
问题1：不知道你是加多大浓度的乙酰胆碱，浓度太低的话舒张不明显，我们这边是逐步加大乙酰胆碱的浓度，来检测内皮依赖性舒张反应。另外，如果乙酰胆碱放置时间太长会失效，建议重新配再做实验。如果排除了乙酰胆碱的原因，那么可能是你的操作损伤了内皮，这时就不会出现舒张。挂血管是个精细活，稍微不注意就会损伤内皮，我刚动手练时经常出现这种结果，练得多就好了。
问题2：在用苯肾上腺素诱导血管预收缩的基础上，用乙酰胆碱诱导血管环张力下降的数值占苯肾上腺素所致血管张力升高数值的百分比来反应血管舒张的程度，也是舒张百分率。
noheart :
非常感谢.
我也请教过其他的人.他们说:"10*-6 或10*-5 Ach是检测内皮完整性的尺度，除内皮时，这一浓度可能血管不反应，也可能收缩，但随着浓度的提高，血管肯定收缩。"
但是我的血管环乙酰胆碱从5*10-8开始,一直加到1*10-5.小浓度不反应,到1*10-6左右就开始反射的增高了。是不是说明血管内皮已经受损了??
请问你做该实验参考的是什么文献?可否赐教?我的文献不多，实在不知道怎么继续做下去了.
noheart :
请问:我的去甲肾上腺素的浓度是1.5*10-6,是不是浓度太高,过度收缩了?所以乙酰胆碱反应性不好啊?
noheart :
请问:我的去甲肾上腺素的浓度是1.5*10-6,是不是浓度太高,过度收缩了?所以乙酰胆碱反应性不好啊?
你所说的现象我刚开始做实验时也频频碰到，应该是血管内皮受损了。另外，你所用的去甲肾上腺素的浓度不算高，过度收缩不太可能。我的建议是，挂血管是个精细活，从分离血管环到挂上血管环这一过程要求十分小心，你才做了三次实验而已。想当初，我们自己练手都要练上一整个暑假，直到正常血管达到80%以上才能正式开展实验。我们实验室挂血管已经有一套成熟的方法，具体的参考文献我不清楚，不过我可以把一整个过程发给你
大鼠麻醉后，迅速开胸，分离、摘取胸主动脉置于冷Krebs-Henseleit（K-H）缓冲液中，充以95% O2和 5% CO2的混合气体。小心剔除血管周围结缔组织及脂肪组织，避免损伤血管内皮。截取3 ~ 4 mm的血管环，将其悬挂于两个不锈钢挂钩上，一端固定于浴槽，另一端连接张力换能器，并与二道生理记录仪相连、记录血管张力变化。血管环置于盛有5 ml K-H液的器官浴槽中，并持续充以95% O2和 5% CO2的混合气体于37℃恒温，加静息张力2 g，每隔15 min更换浴槽中的K-H液一次，共平衡60 min。先用60 mmol/L KCl使血管环平滑肌去极化，重复2 ~ 3次至血管环收缩达坪值；冲洗后重新平衡血管环，再用1μumol/L苯肾上腺素预收缩血，待张力上升并稳定后，加入0.03 ~ 3 μmol/L累积浓度的乙酰胆碱舒张血管，检测血管环的内皮完整性。凡对乙酰胆碱诱导的最大舒张大于80%的血管环被认为内皮完整。
noheart:
非常感谢指导．请再多帮帮我！非常感谢！！还想请问：
１．我新买的乙酰胆碱是上海试剂三厂生产的．是从本地一个代理商那买的，虽然是玻璃瓶密封的，但是是２００３年的，会不会失效？ＳＩＧＭＡ的贵．量又太大，没法买．
２．我在冰块上放上４度预冷的Ｋ－Ｈ液来分离血管结缔组织，并冲洗了几次管腔内的血污，然后用眼科小剪子剪断血管环，轻轻夹着血管环的外壁挂到不锈钢钩上的。请问还有应该注意的问题么？
noheart:
请问:ACH引起的舒张反应是不是在几分钟之内就出现，并且各个浓度之间会有明显的梯度变化?我加入ACH后足足等了一个小时还多。和自然舒张的速度差不多了.
挂血管不可以用镊子夹着挂的，这样损伤肯定很大。我们是先用自己做的钩子慢慢穿进血管环，再轻轻的拿起穿到仪器的钩子上，最后把连着钩子的线挂到换能器上，再来调节张力。
请问：1乙酰胆碱引起的 舒张是不是很明显？
2请问舒张百分率是怎么计算的 啊 ？
问题1：不知道你是加多大浓度的乙酰胆碱，浓度太低的话舒张不明显，我们这边是逐步加大乙酰胆碱的浓度，来检测内皮依赖性舒张反应。另外，如果乙酰胆碱放置时间太长会失效，建议重新配再做实验。如果排除了乙酰胆碱的原因，那么可能是你的操作损伤了内皮，这时就不会出现舒张。挂血管是个精细活，稍微不注意就会损伤内皮，我刚动手练时经常出现这种结果，练得多就好了。
问题2：在用苯肾上腺素诱导血管预收缩的基础上，用乙酰胆碱诱导血管环张力下降的数值占苯肾上腺素所致血管张力升高数值的百分比来反应血管舒张的程度，也是舒张百分率。
noheart :
非常感谢.
我也请教过其他的人.他们说:"10*-6 或10*-5 Ach是检测内皮完整性的尺度，除内皮时，这一浓度可能血管不反应，也可能收缩，但随着浓度的提高，血管肯定收缩。"
但是我的血管环乙酰胆碱从5*10-8开始,一直加到1*10-5.小浓度不反应,到1*10-6左右就开始反射的增高了。是不是说明血管内皮已经受损了??
请问你做该实验参考的是什么文献?可否赐教?我的文献不多，实在不知道怎么继续做下去了.
noheart :
请问:我的去甲肾上腺素的浓度是1.5*10-6,是不是浓度太高,过度收缩了?所以乙酰胆碱反应性不好啊?
noheart :
请问:我的去甲肾上腺素的浓度是1.5*10-6,是不是浓度太高,过度收缩了?所以乙酰胆碱反应性不好啊?
你所说的现象我刚开始做实验时也频频碰到，应该是血管内皮受损了。另外，你所用的去甲肾上腺素的浓度不算高，过度收缩不太可能。我的建议是，挂血管是个精细活，从分离血管环到挂上血管环这一过程要求十分小心，你才做了三次实验而已。想当初，我们自己练手都要练上一整个暑假，直到正常血管达到80%以上才能正式开展实验。我们实验室挂血管已经有一套成熟的方法，具体的参考文献我不清楚，不过我可以把一整个过程发给你
大鼠麻醉后，迅速开胸，分离、摘取胸主动脉置于冷Krebs-Henseleit（K-H）缓冲液中，充以95% O2和 5% CO2的混合气体。小心剔除血管周围结缔组织及脂肪组织，避免损伤血管内皮。截取3 ~ 4 mm的血管环，将其悬挂于两个不锈钢挂钩上，一端固定于浴槽，另一端连接张力换能器，并与二道生理记录仪相连、记录血管张力变化。血管环置于盛有5 ml K-H液的器官浴槽中，并持续充以95% O2和 5% CO2的混合气体于37℃恒温，加静息张力2 g，每隔15 min更换浴槽中的K-H液一次，共平衡60 min。先用60 mmol/L KCl使血管环平滑肌去极化，重复2 ~ 3次至血管环收缩达坪值；冲洗后重新平衡血管环，再用1μumol/L苯肾上腺素预收缩血，待张力上升并稳定后，加入0.03 ~ 3 μmol/L累积浓度的乙酰胆碱舒张血管，检测血管环的内皮完整性。凡对乙酰胆碱诱导的最大舒张大于80%的血管环被认为内皮完整。
noheart:
非常感谢指导．请再多帮帮我！非常感谢！！还想请问：
１．我新买的乙酰胆碱是上海试剂三厂生产的．是从本地一个代理商那买的，虽然是玻璃瓶密封的，但是是２００３年的，会不会失效？ＳＩＧＭＡ的贵．量又太大，没法买．
２．我在冰块上放上４度预冷的Ｋ－Ｈ液来分离血管结缔组织，并冲洗了几次管腔内的血污，然后用眼科小剪子剪断血管环，轻轻夹着血管环的外壁挂到不锈钢钩上的。请问还有应该注意的问题么？
noheart:
请问:ACH引起的舒张反应是不是在几分钟之内就出现，并且各个浓度之间会有明显的梯度变化?我加入ACH后足足等了一个小时还多。和自然舒张的速度差不多了.
挂血管不可以用镊子夹着挂的，这样损伤肯定很大。我们是先用自己做的钩子慢慢穿进血管环，再轻轻的拿起穿到仪器的钩子上，最后把连着钩子的线挂到换能器上，再来调节张力。