各位战友,我想在体外构建表达OATP的细胞,然后在此基础上研究OATP底物之间的相互作用。
有几个疑问想请教:
1、此类文献多为构建稳定表达OATP的HEK293细胞系。然后测算某一药物对另一药物转运的IC50抑制浓度。我想请问下:
1.1 能否构建瞬时转染OATP的HEK293细胞,然后做抑制试验呢?(主要觉得稳转太花时间了)
2、文献中底物多用同位素标记,且加A药同时还加入未用同位素标记的A药。我想问下:
2.1 为什么要同时加入未标记的药物?
2.2 为什么不用HPLC-MS/MS测定药物浓度呢?(是因为质谱测定费用贵,还是因为没有前面同位素标记操作方便)
2.3 同位素标记的药物一般到哪里购买?国内有公司提供不?
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用同位素是因为其检测方便,灵敏度高。液相有时定量限不够,我们实验室就是用质谱检测的。
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