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血浆样品处理问题

时间: 2012-04-23 20:51:01 作者: 来源: 字号:
初次接触血样处理的实验有许多问题不是很明白:
1、分离血浆时采集的血液要立即离心,还是静置一会再离心?有时候采样点不能一次性完成不会影响实验吧?
2、离心获得的血浆要立即放入冰箱中吗?由于采样的时间跨度在7个小时,这样之前分离的血浆要在室温条件下至少放置7个小时(实验的地方没有冰箱),这样可行吗?
3、怎样防止溶血现象?离心获得的血浆都是红色的,抽血时压力不是很大,将血液推入离心管时动作也很缓和(针头已经拔掉),为什么还有溶血现象?
4、-20℃保存的血浆可以保存多久?血浆怎样复溶?是放在室温下自然融化,还是要在一定的水浴温度下融化?
5、取空白血浆之前也要禁食吗?为什么?禁食多久?
6、血浆和血清样品必须要进行蛋白沉淀吗?有的说液液萃取不必进行蛋白沉淀,这种说法正确吗?
7、乙酸乙酯处理血浆,除能提取药物外还能融入血浆中的什么成分?用它提取药物,氮气吹干后再复溶发现离心管底部有些东西溶解不了, 这种情况该怎么办?会不会影响药物的复溶效果?
8、分离血浆用的肝素钠浓度一般是多大的?肝素钠中的水分对血浆样品有影响吗,什么影响?
9、走液相时,样品的色谱峰不是较光滑的线条而是波浪形的线条,这是怎么回事?是柱子的问题吗,怎样解决?




我权当是人类血样的处理哈,如果楼主问的是动物的话仅供参考。
1、分离血浆时采集的血液要立即离心,还是静置一会再离心?有时候采样点不能一次性完成不会影响实验吧?
血浆的离心方法根据试验的目的来定,操作流程按照分离管得说明书操作。
但是,务必保证所有的血样按照统一的规程进行操作,保证结果的可比性。

2、离心获得的血浆要立即放入冰箱中吗?由于采样的时间跨度在7个小时,这样之前分离的血浆要在室温条件下至少放置7个小时(实验的地方没有冰箱),这样可行吗?
获得的血浆尽量放入冷藏/冷冻的环境中,与你分析的目标化合物相关,需要进行方法验证,室温能放置多长时间,对结果测定影响如何,需要数据,有的也许需要马上冷冻,呵呵。
实在没有冰箱,尽量用冰盒来保证。

3、怎样防止溶血现象?离心获得的血浆都是红色的,抽血时压力不是很大,将血液推入离心管时动作也很缓和(针头已经拔掉),为什么还有溶血现象?
关于溶血的问题,很多因素会影响。如果你的样本很多都有溶血的话,需要找到原因。
取血的工具,取血的手法,取血的护士,离心前的放置,离心的参数设定,

4、-20℃保存的血浆可以保存多久?血浆怎样复溶?是放在室温下自然融化,还是要在一定的水浴温度下融化?
如果有-70℃的冰箱,也学更好。短期存贮的话,-20倒也可以。至于多长时间,需要数据,或者查查文献。
复融的话不妨室温,至于能够冻融几次,楼主可以考察一下。
另外,保险起见,可以分多管分别进行存贮,尽量减少复融次数。

5、取空白血浆之前也要禁食吗?为什么?禁食多久?
空血浆应当与样品同样对待。
原因是减少不必要的干扰和解释。

6、血浆和血清样品必须要进行蛋白沉淀吗?有的说液液萃取不必进行蛋白沉淀,这种说法正确吗?
蛋白质沉淀的目的很明显,如果后处理不影响分析,不毁柱子的话,倒也无所谓。

7、乙酸乙酯处理血浆,除能提取药物外还能融入血浆中的什么成分?用它提取药物,氮气吹干后再复溶发现离心管底部有些东西溶解不了, 这种情况该怎么办?会不会影响药物的复溶效果?
充分溶解后过滤吧。
其实这些和你的前处理有关,蛋白质沉淀、柱前处理等等,有机会解决这个问题。不过要考虑回收率之类的问题了。

8、分离血浆用的肝素钠浓度一般是多大的?肝素钠中的水分对血浆样品有影响吗,什么影响?
这个查下工具说吧,呵呵。
水分很大吗?

9、走液相时,样品的色谱峰不是较光滑的线条而是波浪形的线条,这是怎么回事?是柱子的问题吗,怎样解决?
色谱峰是波浪形的线条,你指的不是基线吗?
不排除柱子的问题,多冲洗几遍试试,包括所有流动相的线路。另外,还有检测波长,对于200左右的,很难走平啊,流动相、进样等等都有可能影响啊。
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