本人做了用NBT测黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产生的超氧阴离子清除实验,先加入250ul黄嘌呤,250ulNBT,再加入100ul不同浓度的药物,37度反应5分钟后,加入500ul的黄嘌呤氧化酶,37度反应30分钟,560nm处侧吸光值。反应体系是PH=8的磷酸盐缓冲液,模型是可以造成的,可看到生成蓝色沉淀,但是很奇怪,用阳性药如抗坏血酸,水溶维生素E 100uM都没有反应,不明原因,很是纠结,请问各位有谁做过此方面实验,能否指点一下?谢啦
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