我们现在用液相做指纹图谱，流动相用的是磷酸二氢钠（PH=4.2,用磷酸调的）和甲醇，梯度洗脱，但是听说磷酸二氢钠遇高浓度甲醇回结晶，所以向请教一下，我们用的磷酸盐浓度是0.02mol/L，梯度洗脱甲醇最高比例是40％究竟结晶是它们二者的比例是多少，因为初用液相，请大家多多指教




磷酸盐浓度是0.02mol/L应该没有问题。你不放心的话可以把40%的甲醇和0.02mol/L的磷酸盐在小烧杯里面混合，看看能不能析晶。特别注意点的是：在做完实验后一定要先用纯水冲柱子，再用纯甲醇，不要弄反了，这对于新手很容易搞错。




磷酸盐浓度是0.02mol/L应该没有问题。你不放心的话可以把40%的甲醇和0.02mol/L的磷酸盐在小烧杯里面混合，看看能不能析晶。特别注意点的是：在做完实验后一定要先用纯水冲柱子，再用纯甲醇，不要弄反了，这对于新手很容易搞错。




谢谢，我们试试，我们做含量测定是先用纯水冲的，但指纹图谱先用95的水冲的，没用纯水，谢谢你的提醒




纯水冲的话，时间短些比较好，建议用5％甲醇水冲30min，再上高有机相就行





建议你最好别用纯水来冲。因为纯水冲的话，由于反相柱的填料是硅胶，纯水冲长时间很容易导致整个柱床塌陷，并且导致流动相不易浸润柱子，从而导致柱子的寿命大大缩短。




流动相中有机相应该>=5％，否则容易导致柱床塌陷





您好，那该用多大的比例冲柱子才好？我也是用的磷酸盐




我们一般都是用含有10%甲醇的水冲的。





20mM的话甲醇最高可以到85－90的样子，乙腈最高80％，不过都不建议有机相用到这么高




对于ODS是不可以用纯水冲的..




前一次试验时流动相比较高时，一般用5%的甲醇冲比较好，不要用纯水。