C18反相柱，（250*1.6mm，5um），新柱子活化后测试纯甲醇（1ml/min）压力为791psi，使用三个月后，现在纯甲醇1400psi，没有自动进样器，使用也不频繁，一般用0.02mol/l乙酸铵/甲醇90：:10次数比较多。但每次用完都用纯水和甲醇先后各冲洗30min。样品每次都用0.45um滤膜过滤了。请问可能是什么原因引起的？应该怎么处理？非常感谢。




没有样品信息，柱压升高如果不是系统问题的一般有两种可能，一种是样品在柱前污染，一种是色谱柱塌陷。

看你冲柱子操作可能有问题，一种是如果你色谱柱是普通c18柱，不是耐纯水柱，用纯水冲洗容易损坏色谱柱，建议有机相别低于5%，另外采用纯甲醇的话中间尽量有过度的比例，别走极端。另外你说冲洗30min，没有流速，也代表不了冲洗完全。所以还得自己仔细找下原因




1：柱前接上，柱后不接看下压力有无改善
2：用不同比例的甲醇水多冲洗看看
3：将色谱柱的垫片拆下超声看看。
4：将色谱柱反冲试试
5：更换一部分同种填料
仅供参考。





有道理！




你里面有盐，先用水冲是对的，但不能用纯水冲，会冲坏柱子的，你用水冲的话要掺10%的甲醇，甲醇可以保护柱子冲40min。然后再用纯甲醇冲40min。你的流动相比例是90:10，盐的比例相对很高，所以柱压高是正常的。但是你的柱压高也可能是因为柱子堵了，因为缓冲盐很容易堵柱子的，你有玉柱吗？




纯水不是不可以冲，冲的时间应尽量的短，后续用有机相与水相继续冲洗。
可以设个梯度清洗程序嘛，每次结束进样的时候调用就行了。
例如：



时间（min）
甲醇/乙腈（%）
水（%）
0 10 90
30 10 90
60 90 10
70 90 10