羟喜树碱注射液有关物质的测定采用国家标准YBH00472005 出峰对称因子只有0.6，峰前沿非常厉害。羟喜树碱在制备注射液的时候加碱使内酯环开环成盐而溶于水，现在想测其有关物质，盐基本上在反相柱上不保留；而采用加酸使其环合，但是存在环合不全的问题，增加了有关物质个数，且我采用0.1%三乙胺（磷酸调pH2.5）：乙腈=75:25，供试液用流动相处理使环合，分离出的杂质非常多，不敢确定是原有的杂质还是反应产生的杂质。
请问高手知道这个可以用正相柱不？或者有没有高手做过这个的测定，指点一下啊！！万分感谢！




建议添加离子对试剂，如烷基磺酸盐增大保留时间




请大家帮忙啊