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10%乙腈冲柱子一晚上,柱压还是高

时间: 2012-04-09 12:51:01 作者: 来源: 字号:
前提:

柱子Agilent Eclipse Plus C18 3.5um 4.6*100mm

流动相: A:枸橼酸三钠缓冲液,B:乙腈

分析结束后,因冲柱子设定错误,用纯乙腈冲1min,发现后停止,改用 水:乙腈=90:10,0.5ml/min,柱温

40℃冲洗一晚上约9小时后,柱压为282bar。

取下柱子,同等条件冲洗流路,柱压为25bar。

问题:
柱压高。表现为水:乙腈=90:10,柱温40℃,流速0.5ml/min,柱压为282bar。

处理:

100%异丙醇,0.2ml/min,冲洗,能否解决柱压过高的问题?

或者有更合适的办法?

请不吝赐教!






简单说一下:

首先:你用纯溶剂直接冲洗了,很有可能盐析出来了,这样的情况下,把色谱柱拿下,用有机溶剂的水溶液冲洗就行了,不能用纯异丙醇,因为盐是不溶于异丙醇的,倒是可以用异丙醇水溶液

如果冲洗后发现压力还是很高,那么要考虑更换过滤白头了,如果你用是安捷伦液相的话,其他类似

当上述原因排除了,再把色谱柱接上,用异丙醇水溶液冲洗色谱柱,由于异丙醇粘度大,流速不宜过大,一般情况下问题都能解决

如果还是不能解决,那考虑是不是色谱有问题了,采用再生的办法或许可行




试试温水,0.5流速冲柱。





没有柱子的时候还这么大反压?开Purge阀压力多少?开purge阀纯水流速5ml/min反压超过5bar请更换冲洗阀过滤芯。




其实,刚开始的时候,用乙腈冲了一分钟,这时赶快将柱子卸下来,反过来接,用纯水冲洗,会好些,原因刚开始,盐析出在柱头上,还不算太严重,这时反过来将柱头上的盐冲出来,然后再按正常的柱子接法冲洗,这对柱子不会造成太大的影响。

现在建议你将柱子反接,用纯水冲(现在的柱子质量都比较好了,用水冲没什么问题的),观察柱子压力多少,和原先的比较下,如果有改善,建议将柱子反接,用纯水冲段时间,可将流速设为0.5,试试。




把柱子两端的白头拆下来,先用纯水超声,再用异丙醇超声,在上回去,就这么简单




做实验出现问题很正常了

记得有一次,我的一个同事由于没有看清楚某些个东西导致进样系统堵塞,不得已花了不少时间拆开流通阀,里面有一个孔被盐给堵了

像楼主的问题,其主要问题有

1.做实验要细致

2.发现问题要科学的处理,冲洗色谱柱至少要知道相似相容原理吧

3.排除问题要简后难

4.遇到问题要冷静分析,弄明白问题的所在

5.以后尽量少PM吧,有什么问题尽量发帖回帖讨论,本人能力有限哈




处理措施:
1、取下ODS色谱柱,以90%水相+10%乙腈冲洗系统,一段时间后,柱压降低至正常
2、换了一台只能冲洗色谱柱的旧机子冲洗取下的ODS色谱柱,以90%水相+10%乙腈冲洗,柱压渐渐降低,4h后柱压从186bar将为116bar
3、又将该ODS柱装到1、的系统上,以90%水相+10%乙腈过渡到100%乙腈30min,再继续100%乙腈冲洗30min,柱压降至70bar
教训:一步小的失误,耽误了一天功夫,一定要操作规范、正确。
请批评指正,不胜感激!




看下是不是泵密封垫脏了,换一个
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