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多糖水解不了,什么原因?

时间: 2012-04-07 09:51:01 作者: 来源: 字号:
请教各位一下,我在做一个分子量大概是22000~25000的植物多糖,现在我想把它水解了进行单糖组成测定,但是我查阅了很多文献,使用方法无非就是(1)硫酸水解碳酸钡中和(2)三氟乙酸水解,减压蒸干(3)盐酸水解(4)磷酸水解。其中使用前两种水解方法的占90%左右,后边两种文献说是水解过程慢,效率低一般不采用。
但是我们在操作(以上所有方法全部试验过)的时候发现一个问题,这些所有的操作,都不能将多糖水解(按照HPLC检测,根本就没有单糖出来),不知道是操作过程有问题,还是他们的方法本身有问题?




我在做多糖的水解分析,感觉硫酸水解氢氧化钠中和效果不错。据说Lentinan那大家伙,都可水解,未试验。有空和DCGXY1205交流一下。以下四类典型文献应各有适应范围 (1)硫酸水解碳酸钡中和(2)三氟乙酸水解,减压蒸干(3)盐酸水解(4)磷酸水解。




磷酸反应过于剧烈,可以得到分子量分布比较窄,均一性好的单糖,但反应时间一定要长点。
盐酸水解一起是最常用的,是用浓盐酸在较高温度下水解,得到低聚合度的寡糖。有研究表明温度越高,水解速度就越快得到的寡糖主要是单糖和双糖,四碳以上的糖很少。
硫酸法是一样的。
三氟乙酸TFA,水解液减压蒸去TFA,避免了别的方法中的中和步骤。
如果化学方法不好用,可以选用物理方法,比如:微波法、超声法等等,现在超声法研究较多,可控性好,操作简单。你也可以吧物理方法和化学方法结合起来用,能有很好的效果。超声法你可以查阅一些文献,根据你的多糖分子量选频率和超声时间。
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