小弟最近在打有机酸的液相，包括草酰乙酸、柠檬酸、丙酮酸和丙二酸四种酸，安捷伦的机器和配置的SB-C18短柱,流动相 硫酸和pH2.4的磷酸都试过，出现的问题是四种酸的出峰时间有重叠，混合后无法分开，特别是丙酮酸和丙二酸都是3C，分开比较困难，请问各位大侠有什么好的解决方法吗，还请不吝赐教！




你是用紫外检测器的吗？试试梯度洗脱呢？不行就换不同极性的色谱柱，比如C8柱,苯基柱，氨基柱等。




从结构看，这些物质极性都比较大，用普通C18分离难度很大，可以尝试磷酸盐pH2.5，用耐水性柱子试试。如果还不行，建议改用离子色谱分析。




如果流动相已经是酸性的还是分不开，那这些酸应该在这个柱子上是没保留的，建议换色谱柱。




换柱子加梯度洗脱吧！应该能分开。试过用C18长柱子分甲酸和乙酸，分离度非常好。