我用的是梯度洗脱
岛津20AT
流动相A 甲醇:0.077%乙酸铵溶液（20：:80）
流动相B 甲醇：乙腈（40:60）
之前用的柱子再主峰位置一直没有出现峰，就最近一段时间开始有，换了俩个柱子，柱子一开始主峰位置没有杂峰，现在也有了，用甲醇，异丙醇，四氢呋喃，正己烷：异丙醇（1:1），氯仿：甲醇（1:1）分别冲洗过柱子，仍存在，还有一个现象，每次流动相平衡完第一针空白溶剂主峰位置的杂峰相对较大，第二针相对较小，第三针和第二针大小相当，换过不同液相，结果也有，应该不是系统的原因
请高手帮忙分析下，到底什么原因尼？
是不是自动进样器被污染了？
不进样也有的，而且我从低压梯度机子换到另一台高压梯度机子上也有
是不是梯度转换引起的，最近的试剂更换过吗？
乙酸铵换过了，之前用完了是新买的，跟之前是一个厂家的啊
1.梯度峰
2.溶剂污染
谢谢，之前这个条件做了半年都没出现这么大的梯度峰啊，现在突然出有点奇怪啊，看来最大可能出在流动相上了
Carry over?
从您说的情况来看一定是流动相受到了污染，不然不可能在平衡之后鬼峰面积比较大，第二针又小了。流动相污染主要有以下几种情况：
1、试剂污染。首先要考虑是不是水的问题，提高水的纯净级别能很好的减少鬼峰的出现；其次要考虑添加剂的问题，您既然已经验证过乙酸铵，那可以排除这个原因。
2、流动相容器污染。主要问题是清洗剂，因为大部分的玻璃容器内表面都没有经过硅化处理，吸附清洗剂的可能性还是比较大的，用之前所有的容器，包括量筒、烧杯、流动相瓶、抽滤装置之类的玻璃物品最好都用干净的有机溶剂（我们一般用纯甲醇）涮洗一下，再用干净的水涮洗一下再用。
3、滤膜污染。这是不太容易被注意的一个环节，由于你的流动相B有机溶剂含量较高，有机系的滤膜材料也比较多（尼龙、聚四氟乙烯等），某些品牌或是型号的滤膜可能被有机相溶解（尤其是乙腈比例较大时），出现这种情况时，你可以只用滤膜过滤水，而有机相不过滤，然后配制成流动相进行空白梯度试验，相信你的鬼峰情况会有很大改观。
最后，进行空白梯度试验时，没当您改变条件之后，最好跑两针空白梯度以示对照，不然上一针样品或是流动相的影响很可能对您这一次的分析产生影响，从而造成错误的判断。但愿我的回答能对您有所帮助。
我懂LS的意思了，谢谢腻，很有帮助
岛津20AT
流动相A 甲醇:0.077%乙酸铵溶液（20：:80）
流动相B 甲醇：乙腈（40:60）
之前用的柱子再主峰位置一直没有出现峰，就最近一段时间开始有，换了俩个柱子，柱子一开始主峰位置没有杂峰，现在也有了，用甲醇，异丙醇，四氢呋喃，正己烷：异丙醇（1:1），氯仿：甲醇（1:1）分别冲洗过柱子，仍存在，还有一个现象，每次流动相平衡完第一针空白溶剂主峰位置的杂峰相对较大，第二针相对较小，第三针和第二针大小相当，换过不同液相，结果也有，应该不是系统的原因
请高手帮忙分析下，到底什么原因尼？
是不是自动进样器被污染了？
不进样也有的，而且我从低压梯度机子换到另一台高压梯度机子上也有
是不是梯度转换引起的，最近的试剂更换过吗？
乙酸铵换过了，之前用完了是新买的，跟之前是一个厂家的啊
1.梯度峰
2.溶剂污染
谢谢，之前这个条件做了半年都没出现这么大的梯度峰啊，现在突然出有点奇怪啊，看来最大可能出在流动相上了
Carry over?
从您说的情况来看一定是流动相受到了污染，不然不可能在平衡之后鬼峰面积比较大，第二针又小了。流动相污染主要有以下几种情况：
1、试剂污染。首先要考虑是不是水的问题，提高水的纯净级别能很好的减少鬼峰的出现；其次要考虑添加剂的问题，您既然已经验证过乙酸铵，那可以排除这个原因。
2、流动相容器污染。主要问题是清洗剂，因为大部分的玻璃容器内表面都没有经过硅化处理，吸附清洗剂的可能性还是比较大的，用之前所有的容器，包括量筒、烧杯、流动相瓶、抽滤装置之类的玻璃物品最好都用干净的有机溶剂（我们一般用纯甲醇）涮洗一下，再用干净的水涮洗一下再用。
3、滤膜污染。这是不太容易被注意的一个环节，由于你的流动相B有机溶剂含量较高，有机系的滤膜材料也比较多（尼龙、聚四氟乙烯等），某些品牌或是型号的滤膜可能被有机相溶解（尤其是乙腈比例较大时），出现这种情况时，你可以只用滤膜过滤水，而有机相不过滤，然后配制成流动相进行空白梯度试验，相信你的鬼峰情况会有很大改观。
最后，进行空白梯度试验时，没当您改变条件之后，最好跑两针空白梯度以示对照，不然上一针样品或是流动相的影响很可能对您这一次的分析产生影响，从而造成错误的判断。但愿我的回答能对您有所帮助。
我懂LS的意思了，谢谢腻，很有帮助