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更换流动相的细节

时间: 2012-03-31 03:51:01 作者: 来源: 字号:
在更换流动相时如何操作才是正确的呢1.直接浆泵关掉,换完后再脱气开泵2.将流速调到0后更换3.将流速逐渐缓慢的调到0后,在更换,然后流速在缓慢的调回来

还有在每次开关泵时流速都是要缓慢的变化吗?




首先将流速调为0,将管道更换到已超声脱气的新流动相中,然后拧开脱气伐,大流速排气5分钟,将流速调为0,拧紧脱气伐,流速逐渐升为1或所需流速。




大流速排气只是可以节约时间,对泵并不好。




我们脱气一般就直接按PURGE键了,然后自动脱气,还真没有注意过流速




新手都怕引入气泡,其实马上操作,把滤头换到另一个瓶子,是不会出问题的。




可把流速调为0再换流动相,不必脱气了,曾这样做过,没什么影响




小弟也有个问题,要是流动相不够了,我在原有的瓶子里直接加流动相可以么?这还需要脱气么?




严格说操作肯定不规范,如果只能这样的话最好拿玻璃棒引流,不要直接一下都到进去,我倒过虽然没有气泡但是出峰时间会发生迁移




每次开关泵时流速最好要缓慢。可能直接把流速打上去,很明显的后果看不到。但是压力的快速变化,对柱子是有影响的,会伤柱子,虽然不会立竿见影。对泵到是不会有什么影响




直接浆泵关掉或打开,对柱子损害很大,久而久之柱子的填料就会松动,最主要的就是柱压升高。还是缓和些好啊!




自动切换




肯定是停泵——换流动相——purge——开泵,另外还得看用的是什么样的柱子,如果是某些正相柱(比如我曾用过瓦里安的配位提交换色谱的钙柱),对于压力和温度要求比较严格,必须缓慢降温,在降温的过程中压力会不断升高,要通过调节流速控制压力,最后达到室温才能停泵。至于普通的C18反相柱,直接停泵就是,没有什么影响的。还有purge的时候,安捷伦的机器是需要手动调节流速的,一般设定为5ml/min,岛津的不用设定,控制面板中默认为8ml/min,至于purge的时间,可以根据具体的情况而定。如果更换前后用的同一种流动相,那么你开始purge后,观察流动相瓶的输出管路,如果没有气泡,就可以手动停止purge,如果是两种不同流动相,那么最好purge3min左右。至于流动相不多了直接倒入新的流动相,这种做法是不可取的,毕竟这样会产生一定量的气泡。




如果将流速调为零的话,还用关泵吗,此时泵应该已经停止工作了





关泵跟流速调零是一样的效果。。。。。流速都调零了,泵就不用关了。




我们一般就是将流速调为零即可,




直接倒流动相会使你正在跑的样品峰不平稳




1.流速调零。现在的仪器你调流速到零它都是缓慢下调的。所以应该对柱子的影响会降到最低。
2.更换溶剂。如果是水相的话更换溶剂后可以不用排气,如果是有机相的话最好还是排下气。不过个人观念,只要是你的溶剂事先经过超声脱气处理,而却整个更换过程时间很短的话是不用脱气的,再说现在的HPLC都带有在线脱气机。只要不是特别多的气它还是能应付的。

不过我个人的操作是,如果需要更换流动相的话我会事先用纯水过渡,冲洗个30来分钟,再换上需要的流动相。这样可以排除缓冲盐在遇到有机相占有比例较大的流动相时缓冲盐析出的问题。个人愚见。
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