1 色谱柱跑干了，处理方法：将贮液瓶装入重蒸水，首先按purge键，将柱前气柱排出，若无法排出，可将色谱柱前拆下，用注射器抽吸。待柱前气体排空后，连接色谱柱，用水高低流速交替冲洗色谱柱，直至柱压稳定为止。
2.基线不稳，有静电，处理方法：检查接地是否良好。
3.峰面积变化非常大，处理方法：检查是否进样阀堵塞。
4.基线突然提高，变粗，处理方法：检查样品池能量，若低于正常值，说明检测器污染。
5.柱压变动范围较大，处理方法：多为进气泡。高低流速交替冲洗。
6.柱效或峰形突然变差，处理方法：更换预柱。
7塔板数低 ：色谱柱选择不对，二次保留、峰形不好的影响
8色谱柱易变性：色说柱选择不对，二次保留的影响
9色谱柱寿命短：色谱柱选择不对，样品需预处理（PH<3或PH>7）
10保留值变化：色谱柱平衡不够，流动相比例改变
11出现新的干扰峰：初始分离不够或初始样品无代表性
选择波长要从以下几个方面考虑：
1. 检测波长要大于溶剂截止波长。如果所选择的波长下溶剂有很强的吸收当然是不合适的。溶剂有强吸收后，基线抬高，减小检测的线性范围而且会加大基线噪声，对溶质的检测灵敏度下降。
2. 对各组分都要有适当的吸收。一般是不可能做到的。所以只要选择一个对大多数组分都有较大吸收的波长就可以了。
3. 外标法定量时，要选择被测组份最大吸收波长。
254nm 对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收。对饱和基团也有弱的吸收。而对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高。是在不知道用什么波长时最理想的试验波长。
（一）涡流扩散（Eddy diffusion）
流动相碰到较大的固体颗粒，就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀，有的部分松散或有细沟，则流动相的速度就快；有的部位结块或装直紧密则流就慢，多条流路有快有慢，就使区带变宽。因此，固相载体的颗粒要小而均匀，装柱要松紧均一，这样涡流扩散小，柱效率高。
（二）分子扩散（Molecular diffusion）
分子扩散就是物质分子由浓度高的区域向浓度低的区域运动，也称纵向分子扩散。要减少分子扩散就要采用小而均匀的固相颗粒装柱。同时在操作时，如果流速太慢，被分离物质停留时间长，则扩散严重。
（三）质量转移（Mass transfer）
被分离物质要在流动相与固定相中平衡，这样才能形成较窄的区带。在液相色谱中，溶质分子要在两个液相之间进行分配，或在固相上被吸附和解吸附均需要一定的时间。当流速快时，转移速度慢，来不及达到平衡动相就向前移，这各物质的非平衡移动，使区带变宽。
四）动相流速
当流速太低时，分子扩散严重，特别是在气相色谱中尤为突出。如将理论塔板高度对流速作图，理论塔板高度随流速增加而急速下降，当达到最低值时，流速再加大则质量转移起主要作用，理论塔板高度又加大。在高效液相色谱中，流速稍快影响不大，但在凝胶过滤色谱中，因为物质要渗透到凝胶内部，所以质量转移影响大，流速咖大会降低柱效率。
五）固定相颗粒大小
定相颗粒越小柱效率越高，对流动相流动的阻力越大，需要加大压力才能使它流动。
1、开泵后压力即升高至最高限度，经过对色谱柱前，色谱柱，色谱柱后的分段测试，确定为检测池堵塞。
2、换检测波长后，色谱峰面积比以前做的小很多，怀疑进样环或管路漏夜，经检查，排除，最后确定为，检测波长的显示值和实际值不符。
由气味、景象和声音可以发现的问题
你需要运用你所有的感官去发现液相色谱的问题。你最好养成习惯，每天花上几分钟运用你的感官（除了味觉）来“感觉”你的液相色谱是否存在问题，这样可以帮助你迅速找到问题所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先闻到它的气味。大部分的问题是可以通过眼睛看到。
A、溶剂的气味
原 因 解决方法
1、漏液 1、见前
2、溅出 2、a、检查废液瓶是否已满 b、找到溅出的部位并清洗干净
B、热气味
原 因 解决方法
1、仪器过热 1、a、检查并调节通风设施 b、检查并调节温度设定
c、关掉仪器，查找维修手册
C、读数不正常
原 因 解决方法
1、压力不正常 1、见前
2、柱温箱问题 2、a、检查并调节设定 b、参照用户手册
3、检测器灯失效 3、更换灯
D、灯警告
原 因 解决方法
1、压力超出极限值 1、a、检查是否阻塞 b、检查并调节极限值的设定
2、其它警示灯 2、见用户手册
E、警告音
原 因 解决方法
1、溶剂泄漏/溅出 1、找到并解决
2、其它警告音 2、见用户手册
F、刺耳的短音或长音
原 因 解决方法
1、轴承失效 1、见用户手册
2、润滑不够 2、进行恰当的润滑
3、机械故障 3、见用户手册
进样阀可能发生的问题
A、手动进样阀，转动不灵
原 因 解决方法
1、转子密封损坏 1、更换或调整转子密封
2、转子太紧 2、调整转子的松紧度
B、手动进样阀，载样困难
原 因 解决方法
1、进样阀安装不当 1、重新安装
2、定量环阻塞 2、清洗或更换定量环
3、进样器污染 3、清洗或更换进样器
4、管路阻塞 4、清洗或更换管路
C、自动进样阀，不能转动
原 因 解决方法
1、无压力（或电源） 1、提供恰当的压力（电源）
2、转子太紧 2、调整转子的松紧度
3、进样阀安装不当 3、重新安装
D、自动进样阀，其它问题
原 因 解决方法
1、阻塞 1、清洗或更换阻塞部件
2、机械故障 2、见随机维修手册
3、控制器故障 3、维修或更换控制器
HPLC柱压过高：
1.拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；
2.把色谱柱从仪器上取下来，如果压力仍然不降，则是管路堵塞，须清洗，如果压力下降了，将柱子的进出口反过来接再仪器上，用10倍量柱体积的流动相冲洗柱子，如果柱压仍不降，再检查
3.更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明溶剂获样品中含有固体颗粒，若柱压还高，可在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器 2 1 2 下一页 尾页
2.基线不稳，有静电，处理方法：检查接地是否良好。
3.峰面积变化非常大，处理方法：检查是否进样阀堵塞。
4.基线突然提高，变粗，处理方法：检查样品池能量，若低于正常值，说明检测器污染。
5.柱压变动范围较大，处理方法：多为进气泡。高低流速交替冲洗。
6.柱效或峰形突然变差，处理方法：更换预柱。
7塔板数低 ：色谱柱选择不对，二次保留、峰形不好的影响
8色谱柱易变性：色说柱选择不对，二次保留的影响
9色谱柱寿命短：色谱柱选择不对，样品需预处理（PH<3或PH>7）
10保留值变化：色谱柱平衡不够，流动相比例改变
11出现新的干扰峰：初始分离不够或初始样品无代表性
选择波长要从以下几个方面考虑：
1. 检测波长要大于溶剂截止波长。如果所选择的波长下溶剂有很强的吸收当然是不合适的。溶剂有强吸收后，基线抬高，减小检测的线性范围而且会加大基线噪声，对溶质的检测灵敏度下降。
2. 对各组分都要有适当的吸收。一般是不可能做到的。所以只要选择一个对大多数组分都有较大吸收的波长就可以了。
3. 外标法定量时，要选择被测组份最大吸收波长。
254nm 对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收。对饱和基团也有弱的吸收。而对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高。是在不知道用什么波长时最理想的试验波长。
（一）涡流扩散（Eddy diffusion）
流动相碰到较大的固体颗粒，就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀，有的部分松散或有细沟，则流动相的速度就快；有的部位结块或装直紧密则流就慢，多条流路有快有慢，就使区带变宽。因此，固相载体的颗粒要小而均匀，装柱要松紧均一，这样涡流扩散小，柱效率高。
（二）分子扩散（Molecular diffusion）
分子扩散就是物质分子由浓度高的区域向浓度低的区域运动，也称纵向分子扩散。要减少分子扩散就要采用小而均匀的固相颗粒装柱。同时在操作时，如果流速太慢，被分离物质停留时间长，则扩散严重。
（三）质量转移（Mass transfer）
被分离物质要在流动相与固定相中平衡，这样才能形成较窄的区带。在液相色谱中，溶质分子要在两个液相之间进行分配，或在固相上被吸附和解吸附均需要一定的时间。当流速快时，转移速度慢，来不及达到平衡动相就向前移，这各物质的非平衡移动，使区带变宽。
四）动相流速
当流速太低时，分子扩散严重，特别是在气相色谱中尤为突出。如将理论塔板高度对流速作图，理论塔板高度随流速增加而急速下降，当达到最低值时，流速再加大则质量转移起主要作用，理论塔板高度又加大。在高效液相色谱中，流速稍快影响不大，但在凝胶过滤色谱中，因为物质要渗透到凝胶内部，所以质量转移影响大，流速咖大会降低柱效率。
五）固定相颗粒大小
定相颗粒越小柱效率越高，对流动相流动的阻力越大，需要加大压力才能使它流动。
1、开泵后压力即升高至最高限度，经过对色谱柱前，色谱柱，色谱柱后的分段测试，确定为检测池堵塞。
2、换检测波长后，色谱峰面积比以前做的小很多，怀疑进样环或管路漏夜，经检查，排除，最后确定为，检测波长的显示值和实际值不符。
由气味、景象和声音可以发现的问题
你需要运用你所有的感官去发现液相色谱的问题。你最好养成习惯，每天花上几分钟运用你的感官（除了味觉）来“感觉”你的液相色谱是否存在问题，这样可以帮助你迅速找到问题所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先闻到它的气味。大部分的问题是可以通过眼睛看到。
A、溶剂的气味
原 因 解决方法
1、漏液 1、见前
2、溅出 2、a、检查废液瓶是否已满 b、找到溅出的部位并清洗干净
B、热气味
原 因 解决方法
1、仪器过热 1、a、检查并调节通风设施 b、检查并调节温度设定
c、关掉仪器，查找维修手册
C、读数不正常
原 因 解决方法
1、压力不正常 1、见前
2、柱温箱问题 2、a、检查并调节设定 b、参照用户手册
3、检测器灯失效 3、更换灯
D、灯警告
原 因 解决方法
1、压力超出极限值 1、a、检查是否阻塞 b、检查并调节极限值的设定
2、其它警示灯 2、见用户手册
E、警告音
原 因 解决方法
1、溶剂泄漏/溅出 1、找到并解决
2、其它警告音 2、见用户手册
F、刺耳的短音或长音
原 因 解决方法
1、轴承失效 1、见用户手册
2、润滑不够 2、进行恰当的润滑
3、机械故障 3、见用户手册
进样阀可能发生的问题
A、手动进样阀，转动不灵
原 因 解决方法
1、转子密封损坏 1、更换或调整转子密封
2、转子太紧 2、调整转子的松紧度
B、手动进样阀，载样困难
原 因 解决方法
1、进样阀安装不当 1、重新安装
2、定量环阻塞 2、清洗或更换定量环
3、进样器污染 3、清洗或更换进样器
4、管路阻塞 4、清洗或更换管路
C、自动进样阀，不能转动
原 因 解决方法
1、无压力（或电源） 1、提供恰当的压力（电源）
2、转子太紧 2、调整转子的松紧度
3、进样阀安装不当 3、重新安装
D、自动进样阀，其它问题
原 因 解决方法
1、阻塞 1、清洗或更换阻塞部件
2、机械故障 2、见随机维修手册
3、控制器故障 3、维修或更换控制器
HPLC柱压过高：
1.拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；
2.把色谱柱从仪器上取下来，如果压力仍然不降，则是管路堵塞，须清洗，如果压力下降了，将柱子的进出口反过来接再仪器上，用10倍量柱体积的流动相冲洗柱子，如果柱压仍不降，再检查
3.更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明溶剂获样品中含有固体颗粒，若柱压还高，可在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器 2 1 2 下一页 尾页