今天听了岛津公司的学习班
觉得挺有收获的
现在把一些自己学到的知识写下来,希望能有帮助
1流动相若使用的是HPLC级别的其在出厂前已经用0.2um膜过滤过了,所以使用之前不需要在过滤, 直接超声即可
2乙腈洗脱能力强,柱压低,但是易使输液泵压力不稳,杂质含量高.
所以,使用它时浓度最好在85%以下 , 所以,若使用两台输液泵时,用乙腈做流动相,最好把乙腈和水按比例配置好后放在一个泵上,虽然操作麻烦一些,但对泵的寿命有易.
3流动相中的水必须蒸馏.否则其它的措施均不能除去水中的有机质,时间长了会损害柱子,另外,此蒸馏水及自动进样器中清洗流路的水放置不能超过3天,否则会长菌,若加上一点甲醇混合,一般不会长菌
4流动相中若加入了三乙胺或一些离子化试剂来改善峰型,则在用完后应用水马上冲洗柱子,否则对柱子损害特别大
5每天早上在输液之前或者更换流动相之前都应该把排液阀打开3-5分钟。使残余在流路塑料管中的液体排出
6若是进流动相的塑料管中总有小的气泡,有可能是吸滤头堵了,可以用5% 的硝酸超声15分钟左右
7若柱子最好在三个星期左右清洗一次,用100% 的甲醇冲洗四个小时左右
8排气purge的时间是可以设定了,一般系统是3分钟左右,时间长了对柱塞密封垫的寿命有影响,可以设定的短一些
9若流动相中使用缓冲盐则在用完后清洗柱子的同时,也要用注射器清洗手动进样阀
10进样顺序:在Inject状态下插针---load下进样--- Inject 采集数据
以上是学习心得
希望对大家有所帮助!


用三乙胺对柱子的损害很大?我的一份流动相就是0.3%的三乙胺溶液,用了三个星期了,天哪~
测利巴韦林的时候,流动相是纯水....一个星期,柱子基本报废,55555555555
这几天寝室断网,没有上来
用三乙胺后的确是对柱子有损害,用过后应该用蒸馏水先冲洗,然后用梯度洗脱,保护柱子
很有用!
没问题的 ,我们用Waters的柱子做了几天,没什么影响。不过要注意辅料,很容易出峰。现在用Dikma 铂金的柱子做了很长时间了,柱子没什么大的影响,看起来还不错。稍有拖尾,现在还不清楚是否水的损坏!
学习学习
kankan
关于进样顺序,有个疑问:
我用的是Rheodyne的手动进样器,它的说明书是这样写的:
turn to LOAD -insert the syringe -load the sample-leave the syringe in and turn to INJECT.
即:扳至 LOAD-插针-进样-留针于进样口并扳回INJECT
似乎和楼主所说有些不同。这是由于用的进样器不同吗?
是的,纯水对柱子的损害很大,一般不用纯水作为流动相,特别是反相柱!
写的很好,我是新手,最近在做这个HPLC1100方面的工作,我用的是c18柱,流动相水和乙睛,想请教:
1 流动相用一个泵怎么做梯度洗脱?我的脱气机坏了,我只好做一个泵,正伤脑筋呢!
2 我测了一个标准品,怎么都在1.5分钟左右时就出峰了,不论用什么浓度的乙睛和水配比.我还做了不同浓度的该标准品,从峰面积看1.5分钟出的峰是该物质没错.怎么回事啊?难道该物质挂不了柱?
看了LZ写的我也同样疑问,我们这边岛津的工程师教的进样顺序和你的一样:LOAD-插针-进样-留针于进样口并扳回INJECT
好像听他们工程师说过 如果不先LOAD就插针,容易把某个密封圈什么的弄坏。
太感谢了,我的说明书丢了,正好有所帮助。
就是 LOAD-插针-进样-留针于进样口并扳回INJECT
岛津的培训要不要钱
呵呵
虽然毕业了不用做实验
但是经常回来看看
觉得好亲切啊
你是对 的
“6若是进流动相的塑料管中总有小的气泡,有可能是吸滤头堵了,可以用5% 的硝酸超声15分钟左右”
滤头可以超声吗?我们这的安捷伦工程师说不能超声的,只能用一定浓度的硝酸浸泡。到底该怎么处理呢?
不是由于进样器不同。 原因是 楼主是在进样状态下插入,如果在进样状态下插入,则即使残留有前次注入的样品,它也将被挤出到排出管的方向去,而不会引起交叉污染。这个顺序在进样器的样品回路容量比较小(50ul以下)的时候是非常有效的
岛津的吸滤头一般是铝的,可以超声。安捷伦的是玻璃的,一般不能超声。
请问z注射用水还需要蒸馏吗
不用,注射用水就是蒸馏过的,如果是纯化水的话就还需要蒸馏,一般注射用水制水的时候已经经过了几遍蒸馏,几遍不同孔径滤膜的过滤!
总结的很好,多谢
纠正一点,就算是色谱级的试剂,里面照样含有一定量杂志,为了仪器能够用久一点,建议也要滤膜过滤,否则时间长了还是会堵塞管路和柱子。我们实验室用的是fisher的色谱级有机溶剂,用有机滤膜过滤后,可以看见膜上很脏,有相当多的杂质。
要看你的仪器是什么型号的,岛津的就可以超声的,我们有台安捷伦的就不能超声。
岛津的是不锈钢吸滤头,可以超声;安捷伦有玻璃的吸滤头,不能超声
恩,恩,学习学习
不要钱!~这是客服~可以打电话咨询的~
觉得挺有收获的
现在把一些自己学到的知识写下来,希望能有帮助
1流动相若使用的是HPLC级别的其在出厂前已经用0.2um膜过滤过了,所以使用之前不需要在过滤, 直接超声即可
2乙腈洗脱能力强,柱压低,但是易使输液泵压力不稳,杂质含量高.
所以,使用它时浓度最好在85%以下 , 所以,若使用两台输液泵时,用乙腈做流动相,最好把乙腈和水按比例配置好后放在一个泵上,虽然操作麻烦一些,但对泵的寿命有易.
3流动相中的水必须蒸馏.否则其它的措施均不能除去水中的有机质,时间长了会损害柱子,另外,此蒸馏水及自动进样器中清洗流路的水放置不能超过3天,否则会长菌,若加上一点甲醇混合,一般不会长菌
4流动相中若加入了三乙胺或一些离子化试剂来改善峰型,则在用完后应用水马上冲洗柱子,否则对柱子损害特别大
5每天早上在输液之前或者更换流动相之前都应该把排液阀打开3-5分钟。使残余在流路塑料管中的液体排出
6若是进流动相的塑料管中总有小的气泡,有可能是吸滤头堵了,可以用5% 的硝酸超声15分钟左右
7若柱子最好在三个星期左右清洗一次,用100% 的甲醇冲洗四个小时左右
8排气purge的时间是可以设定了,一般系统是3分钟左右,时间长了对柱塞密封垫的寿命有影响,可以设定的短一些
9若流动相中使用缓冲盐则在用完后清洗柱子的同时,也要用注射器清洗手动进样阀
10进样顺序:在Inject状态下插针---load下进样--- Inject 采集数据
以上是学习心得
希望对大家有所帮助!


用三乙胺对柱子的损害很大?我的一份流动相就是0.3%的三乙胺溶液,用了三个星期了,天哪~
测利巴韦林的时候,流动相是纯水....一个星期,柱子基本报废,55555555555
这几天寝室断网,没有上来
用三乙胺后的确是对柱子有损害,用过后应该用蒸馏水先冲洗,然后用梯度洗脱,保护柱子
很有用!
没问题的 ,我们用Waters的柱子做了几天,没什么影响。不过要注意辅料,很容易出峰。现在用Dikma 铂金的柱子做了很长时间了,柱子没什么大的影响,看起来还不错。稍有拖尾,现在还不清楚是否水的损坏!
学习学习
kankan
关于进样顺序,有个疑问:
我用的是Rheodyne的手动进样器,它的说明书是这样写的:
turn to LOAD -insert the syringe -load the sample-leave the syringe in and turn to INJECT.
即:扳至 LOAD-插针-进样-留针于进样口并扳回INJECT
似乎和楼主所说有些不同。这是由于用的进样器不同吗?
是的,纯水对柱子的损害很大,一般不用纯水作为流动相,特别是反相柱!
写的很好,我是新手,最近在做这个HPLC1100方面的工作,我用的是c18柱,流动相水和乙睛,想请教:
1 流动相用一个泵怎么做梯度洗脱?我的脱气机坏了,我只好做一个泵,正伤脑筋呢!
2 我测了一个标准品,怎么都在1.5分钟左右时就出峰了,不论用什么浓度的乙睛和水配比.我还做了不同浓度的该标准品,从峰面积看1.5分钟出的峰是该物质没错.怎么回事啊?难道该物质挂不了柱?
看了LZ写的我也同样疑问,我们这边岛津的工程师教的进样顺序和你的一样:LOAD-插针-进样-留针于进样口并扳回INJECT
好像听他们工程师说过 如果不先LOAD就插针,容易把某个密封圈什么的弄坏。
太感谢了,我的说明书丢了,正好有所帮助。
就是 LOAD-插针-进样-留针于进样口并扳回INJECT
岛津的培训要不要钱
呵呵
虽然毕业了不用做实验
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你是对 的
“6若是进流动相的塑料管中总有小的气泡,有可能是吸滤头堵了,可以用5% 的硝酸超声15分钟左右”
滤头可以超声吗?我们这的安捷伦工程师说不能超声的,只能用一定浓度的硝酸浸泡。到底该怎么处理呢?
不是由于进样器不同。 原因是 楼主是在进样状态下插入,如果在进样状态下插入,则即使残留有前次注入的样品,它也将被挤出到排出管的方向去,而不会引起交叉污染。这个顺序在进样器的样品回路容量比较小(50ul以下)的时候是非常有效的
岛津的吸滤头一般是铝的,可以超声。安捷伦的是玻璃的,一般不能超声。
请问z注射用水还需要蒸馏吗
不用,注射用水就是蒸馏过的,如果是纯化水的话就还需要蒸馏,一般注射用水制水的时候已经经过了几遍蒸馏,几遍不同孔径滤膜的过滤!
总结的很好,多谢
纠正一点,就算是色谱级的试剂,里面照样含有一定量杂志,为了仪器能够用久一点,建议也要滤膜过滤,否则时间长了还是会堵塞管路和柱子。我们实验室用的是fisher的色谱级有机溶剂,用有机滤膜过滤后,可以看见膜上很脏,有相当多的杂质。
要看你的仪器是什么型号的,岛津的就可以超声的,我们有台安捷伦的就不能超声。
岛津的是不锈钢吸滤头,可以超声;安捷伦有玻璃的吸滤头,不能超声
恩,恩,学习学习
不要钱!~这是客服~可以打电话咨询的~