各位前辈，我现有一种药，流动相原来是10%四丁基氢氧化胺（PH8.0）：乙腈=80:20，水相中加入了三乙胺，但用原流动相走，出双峰，后我们改了条件，调PH变为3.0，出单峰但是拖尾严重，之后我们试过加冰醋酸，增加缓冲盐量，加EDTA等方法，拖尾情况都没有改变，我们柱温是40度，色谱柱是C18柱，请大家帮帮忙吧！小女子不胜感激。。。




有可能你的图本来是有两个峰的，你修改条件后主峰时间提前了吗？还是延后？
一般加三乙胺就是为了改善峰拖尾，还要看主药的性质，主药的PKa也需要考虑的。




首先有两个疑问：
1.原流动相为什么要改变？是因为出双峰？这双峰拖尾吗？双峰是不是你的样品不纯啊？10%的四丁基氢氧化铵，这个浓度有点高吧。
2.你求助的是拖尾的解决，那你坚持采用加酸体系的流动相。
拖尾的解决我觉得可以：
1.pH 2.0或1.0
2.更换其他品牌的色谱柱。
3.更换酸为TFA
4.提供结构式或更详细的信息，我应该可以帮助你。




我推断你应该做的是弱碱性化合物，在pH8.0的时候，其部分解离，形成了分子和离子这两种形式，显然这两种形式的保留特性不一致，因此出双峰也就不奇怪，在ph3.0的情况下，全部是以离子形式存在，因此只出单峰。但是离子形态的碱性化合物它会和色谱柱表面的残余硅醇基结合，造成拖尾，也就出现你所说的现象。
以上仅是我的推断。如果推断正确，那么我们可以采用封端的色谱柱来改善碱性化合物的峰形。封端的色谱柱应该各个公司都有，你可以咨询一下色谱柱厂家。另外现在还有硅胶包被的色谱柱，比封端的硅醇基残留更少，比如资生堂的capcell pak，同时可以减少残留金属的影响（你的不是这种情况，因为EDTA无改善）。
以上情况，仅供参考，有好消息告诉大家。





不知道楼主原来的方法参考来源是哪？四丁基氢氧化胺、三乙胺、PH8.0、PH3.0、冰醋酸、增加缓冲盐量、加EDTA、、、、、、如果这么试条件的话，足以毁掉一根全新的色谱柱，建议根据药物性质，多查找文献，多咨询资深老师。