本人现在正在做一个化药缓释制剂的释放度考察,结果发现在用液相测定释放度的时候,柱子的理论塔板数下降恐怖的吓人。由于样品粘度过大,所以只能用0.8微米的滤膜过滤。请问各位大虾们有遇到过这种情况吗?如何解决的啊?我用的柱子是Ecosil ODS C18的,流动相是甲醇乙腈水,没有缓冲盐
可将样品离心后,再用0.45微米滤膜过滤。
请问用的是什么品牌的色谱柱啊?
除了离心,可能该样品对色谱柱的选择性更大
个人觉得你可以考虑下:
1.你的流动相组成性质如PH,盐可能和你的柱子所适用范围不匹配;
2.我之前遇到了柱效下降明显,且保留时间也有大的变化,后来发现原来是因为柱子脏了,好好冲下就好了
我也遇到同样的问题了,我的流动相里面有四丁基氢氧化铵溶液,柱效也是下降的很快,柱子冲完之后用不到一天就不行了,不知道路怎么办?
使用HPLC的规程明确规定样品配置完成后要能通过0.45um的滤膜.
移动相配置后要脱气等.
请问你的系统压力多少?会不会已经堵住了.堵住的话你有没有装filter,guard column.有的话就换一个试试.
换了之后压力还是不下来,就是column堵了.要用能溶解或解吸收潜在污染物的溶液低流速冲洗柱子。柱子厂家都有介绍用一系列强度递增的溶液来完成这个工作的。对反相柱来说,可以采取如下程序:水,甲醇,THF,二氯甲烷,甲醇再回到水.
最后还是没用,再买一跟column.
柱压5.6MP,有预柱,流动相每天使用前都会脱气,由于样品溶液粘稠,0.45um过滤不了才选择了0.8um的,除此之外均为正常操作。
1.样品一定要处理好
2.色谱条件个人觉得还要提高,可能洗脱能力不够
3.选择其他体系比如正相
可将样品离心后,再用0.45微米滤膜过滤。
请问用的是什么品牌的色谱柱啊?
除了离心,可能该样品对色谱柱的选择性更大
个人觉得你可以考虑下:
1.你的流动相组成性质如PH,盐可能和你的柱子所适用范围不匹配;
2.我之前遇到了柱效下降明显,且保留时间也有大的变化,后来发现原来是因为柱子脏了,好好冲下就好了
我也遇到同样的问题了,我的流动相里面有四丁基氢氧化铵溶液,柱效也是下降的很快,柱子冲完之后用不到一天就不行了,不知道路怎么办?
使用HPLC的规程明确规定样品配置完成后要能通过0.45um的滤膜.
移动相配置后要脱气等.
请问你的系统压力多少?会不会已经堵住了.堵住的话你有没有装filter,guard column.有的话就换一个试试.
换了之后压力还是不下来,就是column堵了.要用能溶解或解吸收潜在污染物的溶液低流速冲洗柱子。柱子厂家都有介绍用一系列强度递增的溶液来完成这个工作的。对反相柱来说,可以采取如下程序:水,甲醇,THF,二氯甲烷,甲醇再回到水.
最后还是没用,再买一跟column.
柱压5.6MP,有预柱,流动相每天使用前都会脱气,由于样品溶液粘稠,0.45um过滤不了才选择了0.8um的,除此之外均为正常操作。
1.样品一定要处理好
2.色谱条件个人觉得还要提高,可能洗脱能力不够
3.选择其他体系比如正相