我想用UV法测总生物碱的含量,但是样品和对照品的最大吸收波长不一致,相差20nm,样品已经经过纯化处理,但还是不一致,请各位高手指点.
总生物碱是个混合物还是单一化合物
总生物碱是混合物,不是单一化合物,对照品的最大吸收波长是249nm,但样品是269nm,是否意味着该药材的总生物碱含量不能用紫外来测量了呢?
你这个对照品是总生物碱中的一个吧?
我想原因是这样的:
你所选的对照品和总生物碱在结构骨架上有一些差异,所有紫外吸收不同
所以,建议你选用总生物碱中代表性强的那个生物碱作为对照品
比如吸收和总生物碱一致的
或者能代表总生物碱典型骨架类型的那一个作对照品
可以参考药典总黄酮含量的测定,你的对照品是纯品,总生物碱是混合物,你可以用显色反应生成一致的物质后测定。如茚三酮反应等
楼上说的对!这种情况很正常.你用HPLC分一下就知道有没有了
总一类成分的测定,是利用对照品对比法,测定样品与对照品相应的最大吸收波长的吸光度,再计算含量。大家都知道,测定总一类成分,当然是混合物,有很多的成分,比如LZ要测定的生物碱,里面有多种生物碱成分,也含有其他类的成分。所以,对照品有最大吸收处,不一定是样品的最大吸收波长处,因为对照品是单体成分,而样品含有很多的成分在里面,但样品和对照品最大吸收波长处对应的吸光度肯定是生物碱成分产生的吸收,而样品的最大吸收波长处,并不一定是生物碱产生的吸收。我们在测定总一类成分时,只要找到对照品的最大吸收波长,不管样品是否是,都按照对照品的最大吸收处来测定吸光度。
用对照品的最大吸收波长检测,表述为本品含总碱以XXXX(对照品)计
对照品选的不是那么合适
总生物碱是个混合物还是单一化合物
总生物碱是混合物,不是单一化合物,对照品的最大吸收波长是249nm,但样品是269nm,是否意味着该药材的总生物碱含量不能用紫外来测量了呢?
你这个对照品是总生物碱中的一个吧?
我想原因是这样的:
你所选的对照品和总生物碱在结构骨架上有一些差异,所有紫外吸收不同
所以,建议你选用总生物碱中代表性强的那个生物碱作为对照品
比如吸收和总生物碱一致的
或者能代表总生物碱典型骨架类型的那一个作对照品
可以参考药典总黄酮含量的测定,你的对照品是纯品,总生物碱是混合物,你可以用显色反应生成一致的物质后测定。如茚三酮反应等
楼上说的对!这种情况很正常.你用HPLC分一下就知道有没有了
总一类成分的测定,是利用对照品对比法,测定样品与对照品相应的最大吸收波长的吸光度,再计算含量。大家都知道,测定总一类成分,当然是混合物,有很多的成分,比如LZ要测定的生物碱,里面有多种生物碱成分,也含有其他类的成分。所以,对照品有最大吸收处,不一定是样品的最大吸收波长处,因为对照品是单体成分,而样品含有很多的成分在里面,但样品和对照品最大吸收波长处对应的吸光度肯定是生物碱成分产生的吸收,而样品的最大吸收波长处,并不一定是生物碱产生的吸收。我们在测定总一类成分时,只要找到对照品的最大吸收波长,不管样品是否是,都按照对照品的最大吸收处来测定吸光度。
用对照品的最大吸收波长检测,表述为本品含总碱以XXXX(对照品)计
对照品选的不是那么合适