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水部位能不能用硅胶柱(非反相)分?

时间: 2008-09-22 00:32:26 作者: 来源: 字号:
 我是新手,刚进实验室实习,要分水部位,不知道能不能用硅胶
柱?问过有经验的人,分水部位一般用反相柱,可我这没有,急等着拌样,
请各位高手指教!另外,分水部位一般的流程怎样,需要注意些什么?
 我用水部位浓缩液甲醇溶后跑硅胶板,展开剂为甲醇-氯仿6:1,在
RF值约0.75处有一大点,另有自原点处的拖尾但颜色较浅,如果用硅胶柱分,应怎么样选择展开剂?
 
门市冷清啊,自己顶一下吧
氯仿:甲醇:水 系统试试,极性大时用这个系统很多的
刚开始可以用正相硅胶的,我的样品都是走过两遍硅胶的了.氯仿:甲醇:水 系统.
然后再走凝胶或者反相.
我就是做水溶性部位的,关注中!
用D101
其实只要你保证洗脱剂极性大于硅胶也就可以了 和反相柱一个道理 只是可能柱效略低而已 大不了用纯水洗脱
正相硅胶柱的洗脱剂千万不能用水,你可以试试氯仿:甲醇系统梯度洗脱,洗脱剂极性慢慢加大。
那请问一下,可以在洗脱液中加乙酸吗?

有没有拿正丁醇:乙酸:水来冲硅胶的?
正丁醇黏度太大
至于能不能用硅胶柱应视情况而定,不能严格的说能或不能,例如有足够的量时,可考虑用氯仿:甲醇系统冲柱,若样品较少还是不考虑上正向硅胶的好,关注学习中!
对,很赞成楼上的意见

今天我去拜访我们院的一个比较牛的教授,他说并不是反相硅胶柱效果都会好的

相反,正相硅胶柱未必不能分大极性的东西
如果硅胶板能跑上去的,换成硅胶柱也可以冲下来
就是时间长短的问题 如果冲下来比较慢柱子可以装的短粗一点
还有就是样品量的问题了 样品量大的话就不用太担心 如果量少的话吸附就会比较大 样品损失严重

顺便问一个问题: 硅胶柱一般用哪些洗脱溶剂呢?
刚才我听说不能用正丁醇 粘度大
假如我跑薄层板用正丁醇:乙酸:水=5:2:3 那么换成硅胶柱应该用什么样的流动相呢?配比大概多少比较合适?大家可以提供一点参考意见吗?!
跑板选择的溶剂只是检查看看你里面有没有东西,但换到柱子里面的话就不一点能用这种体系了。比如含有正丁醇和醋酸的体系。
正丁醇粘度大,过柱很慢,一般别的溶剂两个星期能过完的,含正丁醇的话可能一个月你也跑不完,样品在柱子里面保留太久可能会发生变化,尤其是你大极性的 东西,还会和硅胶产生死吸附。
含醋酸的体系相当的不好回收溶剂,尤其你现在还是粗分,耗溶剂比较大,建议还是不要用醋酸上柱。
你可以用正相吸附体系如:氯仿:甲醇梯度洗脱。或分配体系:氯仿:甲醇:水试试。分配体系我不大用,不知道效果。我一般还是用正相体系粗分,效果还不错。
好的,楼上的朋友!
继续学习中!
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