调整参数，让两个主峰跟靠近，且2主峰与相邻分开
大家好
我在为分离两个主峰摸索条件

1）流动相：甲醇：0.05%醋酸水
0--10min40%：60% 10--60min54%：46%
第一个主峰在10分钟左右出峰，与杂质峰的分离效果较好，而第二个主峰出峰时间在50分钟左右出峰，并且与相邻峰分离效果不好（杂质峰在主峰前面）

2）调整流动相比例后用甲醇：0.05%醋酸水
0--10min40%:60% 10--50min 65:35%
第一主峰出峰在10min左右，与杂质峰分离效果好，第二个主峰出峰时间在37min出峰，还是与相邻峰分离度不好（杂质峰在主峰后面）

我试过减流速，流速减到0.8ml/min后分离效果好点，但是第二峰的保留时间更长了

怎样才能将第二主峰与杂质峰分开，并且第二主峰的保留时间与第一主峰更靠近



是ods柱吗？你将10min～50min的流动相中水的比例升高试试，如果不行再将流速降低，或者试试开柱温箱看看～

从楼主的描述来看第二主峰附近的杂质在流动相比例调整的过程中，从主峰前变到了主峰后出峰，这个还需要楼主确认一下。
关于梯度的调整，建议楼主在10分钟后的梯度调整时，甲醇比例快达到第二主峰出峰比例时改为等度洗脱，或许能增大杂质与主峰的分离度。
或者将甲醇换为乙腈。

加离子剂就可以分得很开！

1， 有个事，不太正常。楼主调整梯度后，第2主峰和杂质位置出现了互掉，这个，建议要验证一下。这种情况相对少，需要确认一下是不是同一杂质。
2， 除此杂质外，两主峰间还有其他杂质吗？楼主没有提到，没有的话。中间这么大一段时间，完全可以速度拉快点。增加一个梯度，在接近第2主峰时，再加大比例拉开第2主峰和杂质。楼主46%，还是35%，都还很在考中间啊，有足够的空间调整比例呢。
3， 选相对长的柱子或 相对小孔径的柱子，增强柱效。
4， 峰型怎么样、极限如何啊？梯度系统，经常有问题，加扫尾剂或则必要时加离子对试剂都可以试试。