硅胶柱层析后，我准备用反相填料柱层析脱色素，但不知道需要注意那些东西，求大侠帮助一下哈？
我的反相填料预处理是直接在纯甲醇里浸泡的，直接上柱吗？样品怎样上柱？甲醇-水系统，需要梯度洗脱吗？还有我们没有反相硅胶板，你们怎么样确定洗脱剂的比例，甲醇-水系统？
大家啦



应该可以直接上柱的，装柱应均匀压实了。柱装好后加样液，再加洗脱液。如果是多种色素，可用梯度洗脱，单一色素就不必了。洗脱液组成比例可以查查参考文献，再自己摸索一下。

好的，

可以直接将材料用甲醇浸泡后湿法装柱，装好后，反复用甲醇冲洗，平衡好后，在将柱内溶剂用水替代，当甲醇全部替代出来后，就可以上样了啊，也是湿法上样，样品使用尽量少得溶剂溶解，上好后，挂在柱上十来分钟，就可以用甲醇-水梯度洗脱了，如果无法确定极性，你可以从10%的甲醇-水开始梯度慢慢洗脱，不过这样比较耗时间啊

说到这个问题 我也有一个问题请教 我用反相硅胶时就用甲醇浸泡了下 就直接装柱上样了 结果冲下来很多白色的像脂肪一样的固体 但点板没有点 不知道你们有没有遇到过这种情况 是怎么回事呢？


我觉得可能是材料有点问题啊


呵呵，我不太懂

，thank u all the same！


这是填料没有冲干净
装柱的时候好好用纯甲醇多洗洗

装柱梯度洗脱湿法上样，除色素还是MCI好些吧