刚上手实验,很多不懂的,望大家多指教,我要分的样品在前期已经证明了正丁醇萃取部位有活性,不过乙酸乙酯和水萃取相也有活性比较小吧。。可是现在老板的意思是正丁醇萃比较麻烦(难旋),让我用80乙醇提取样品,脱醇之后的水浊液 分为水溶的和水不溶的(就是沉淀)然后水溶的上清上D101大孔树脂,沉淀做硅胶柱。 我要分的东西应该是黄酮类的吧,有护肝作用的东西。我现在的问题是。
1.硅胶柱的回收率不稳定,我用的是氯仿甲醇的洗脱体系,不过感觉好像在7:3的时候就能把大部分东西洗下来了,而且在TLC 的板子上斑点全在上面,就是几个样斑点都差不多。。这是不是说明洗脱体系不好?
2.展开剂我用的氯仿甲醇甲酸的,不过一直感觉点缩的不是很好,是不是跟显色剂有关?我用 三氯化铁 和硫酸乙醇的显色剂,想问问这两种显色剂分别对什么物质敏感?
先问这些吧,思绪有些混乱,不知道我这个实验整体设计方案是不是有问题,大家多多指教!!
1.硅胶柱的回收率不稳定,我用的是氯仿甲醇的洗脱体系,不过感觉好像在7:3的时候就能把大部分东西洗下来了,而且在TLC 的板子上斑点全在上面,就是几个样斑点都差不多。。这是不是说明洗脱体系不好?
2.展开剂我用的氯仿甲醇甲酸的,不过一直感觉点缩的不是很好,是不是跟显色剂有关?我用 三氯化铁 和硫酸乙醇的显色剂,想问问这两种显色剂分别对什么物质敏感?
先问这些吧,思绪有些混乱,不知道我这个实验整体设计方案是不是有问题,大家多多指教!!