我有个皂甙混合物采用硅胶柱层析的方法分不开，想用反相硅胶柱（不是HPLC，只是用反相硅胶填料自己装一个普通的柱子）试试。我有一瓶ODS填料，粒度是50微米。想请问一下各位高手，硅胶和样品的比例多少比较合适？反相硅胶用什么装柱，据说反相硅胶是可以反复利用的，用完之后用什么溶剂洗柱子？还需要干燥保存吗？

反相硅胶也叫ODS，用甲醇装柱子，用甲醇-水做洗脱剂，开始用低济度的甲醇，慢慢加大甲醇的量，最后用甲醇冲柱子，用甲醇保存就可以了

非常感谢您的指导，我今天再试一试

裸花紫珠怎么提取有效成分？


请问一下您 我样品是黄酮类溶于甲醇但不溶于水中 过反相硅胶柱时样品要怎么处理才能上柱？ 是湿法上柱还是干法上柱比较好？还有 我有试过湿法上柱， 但是 样品若溶于甲醇中 样品在柱子中就会很快留下来； 但是若用流动相即按比例配好的甲醇和水的混合溶剂溶的话 就会发现样品中有不溶物析出。请问您 有什么好的方法吗？ 本人刚接触分离 有很多地方不懂 还希望您多多指点

请问你那个加样品（ods甲醇上样一下留下去了，洗脱剂不能溶解）的问题，怎么处理的呢，我遇到同样的问题 ，，该怎么办呢？？？？？


1，推荐你使用HPLC试试。也是选用反向硅胶柱，流动相为乙腈-水或者是甲醇-水。这样的分离效果和分离效率肯定比你自己装柱子要高很多倍！而且你的样品是黄酮类的天然产物，那么它的或是它这一类的化合物的HPLC分离条件文献中可定有大量记载，你也有参考依据了！自己装的反相硅胶柱酯适合于分离极性差别明显的两种或三种等样品的分离，如果要分离物的种类很多的话，是没有明显效果。
2， 推荐你使用正相硅胶柱层析方法试试。原理和反向类似，只是出峰顺序相反。个人觉得对你这种要分离的天然产物，正相硅胶柱层析较反向更有优势。而且天然产物的这种分离条件文献中也要大量记载，你可以在参考的基础上进行优化。