目前本人利用大孔树脂D101分离乌药中的生物碱,步骤如下:
1.稀盐酸水(0.2%)溶解样品上样
2.用0.5%氨水洗一个柱体积
3.10%乙醇洗4个柱体积
4.20%乙醇洗4个柱体积
5.50%乙醇洗4个柱体积
结果发现20%和50%醇中都有目标化合物,且20%醇洗第二柱体积洗脱液中目标生物碱浓度最大;50%醇洗也是第二柱体积洗脱液中生物碱浓度最大。
问题:1.20醇和50都能洗出来,且均在第二柱体积洗脱液中浓度最高是不是意味着拖尾,各位有何建议,或者改良办法;亦或者我的实验设计有不妥之处请指出。
是不是吸附的时间不够,没有把东西挂住?
2.或者是酸溶使之成为离子,不能用有机溶剂溶吗,用含碱性的的醇冲洗,或者效果会好些。建议先用一个小的柱子预实验一下!
3.希望你能不实验效果分享一下!
用稀酸溶解上样恐怕不是太好,大孔D101不是离子交换树脂应该不容易吸附挂柱,应该用水溶解上样
可是生物碱样品在水里溶解度太低啊啊
上样样品尽量多加水稀释,水溶液上样比较好;同时,根据我个人的经验,部分生物碱可能用大孔吸附树脂是不能完全洗脱下来的,有可能不同醇度一直有拖尾
为什么要用氨水洗下呢?直接水就可以了吧,还有你测的生物碱应该是总组分吧,不同生物碱肯定吸附是不一样的,所以你可以选择一个浓度,比如30%,或40%乙醇 浓度来洗脱。
大孔吸附树脂就应该在酸性条件下上样,不是有拖尾,吸附到一定程度,你用小浓度的洗,一些结合力不太强的就先洗下来了,换浓度大的又能洗下来一些。如果你的样品分离的还可以,建议直接用浓度大一些的洗,这样所得的产品浓度更大
我现在就是这种情况啊,20醇和50醇分别出现了峰值,是不是洗脱不该用碱水啊?
还是应该一直用碱醇洗脱下来
你的意思是先用10%乙醇洗完之后直接上50%醇?
不用加氨水洗的步骤?
请指教
可以直接用50%或更大浓度的洗,氨水如果能洗掉杂质,就不用取消,碱性醇溶液洗脱能力更强,希望能有所帮助
1.稀盐酸水(0.2%)溶解样品上样
2.用0.5%氨水洗一个柱体积
3.10%乙醇洗4个柱体积
4.20%乙醇洗4个柱体积
5.50%乙醇洗4个柱体积
结果发现20%和50%醇中都有目标化合物,且20%醇洗第二柱体积洗脱液中目标生物碱浓度最大;50%醇洗也是第二柱体积洗脱液中生物碱浓度最大。
问题:1.20醇和50都能洗出来,且均在第二柱体积洗脱液中浓度最高是不是意味着拖尾,各位有何建议,或者改良办法;亦或者我的实验设计有不妥之处请指出。
是不是吸附的时间不够,没有把东西挂住?
2.或者是酸溶使之成为离子,不能用有机溶剂溶吗,用含碱性的的醇冲洗,或者效果会好些。建议先用一个小的柱子预实验一下!
3.希望你能不实验效果分享一下!
用稀酸溶解上样恐怕不是太好,大孔D101不是离子交换树脂应该不容易吸附挂柱,应该用水溶解上样
可是生物碱样品在水里溶解度太低啊啊
上样样品尽量多加水稀释,水溶液上样比较好;同时,根据我个人的经验,部分生物碱可能用大孔吸附树脂是不能完全洗脱下来的,有可能不同醇度一直有拖尾
为什么要用氨水洗下呢?直接水就可以了吧,还有你测的生物碱应该是总组分吧,不同生物碱肯定吸附是不一样的,所以你可以选择一个浓度,比如30%,或40%乙醇 浓度来洗脱。
大孔吸附树脂就应该在酸性条件下上样,不是有拖尾,吸附到一定程度,你用小浓度的洗,一些结合力不太强的就先洗下来了,换浓度大的又能洗下来一些。如果你的样品分离的还可以,建议直接用浓度大一些的洗,这样所得的产品浓度更大
我现在就是这种情况啊,20醇和50醇分别出现了峰值,是不是洗脱不该用碱水啊?
还是应该一直用碱醇洗脱下来
你的意思是先用10%乙醇洗完之后直接上50%醇?
不用加氨水洗的步骤?
请指教
可以直接用50%或更大浓度的洗,氨水如果能洗掉杂质,就不用取消,碱性醇溶液洗脱能力更强,希望能有所帮助