求助:我现在在用反相硅胶分离样品,用的水溶的样品,初步定为甲醇-水的洗脱溶剂,但是在我上完样后先用水冲,我的样大部分就已经被冲下来了,柱子的颜色就基本从棕色变成了淡淡的黄色,检测了下后面基本已经没有我要的成分了,基本是没有分开,我不清楚出现这个状况的原因啊哪位可帮帮我啊 我实在不知道咋整了~~
方法没错的话只能说明你的样品不适合用反相,可以试试其它的填料
洗脱系统比例恰当的前提下
应该是反相对样品分离效果一般
试试其他手段 正相 凝胶之类的
柱子有颜色那应该是脱掉的色吧 纯甲醇冲冲应该可以洗干净的
可是相关的文献中有报道用反相可以分开,砸到了我的手里就分不开了呢?我很是纳闷啊
可以最开始不用纯水冲吗?好像有老师给我建议让我用5%或者10%的甲醇在最开始的时候冲,那样成吗?
ods柱子洗脱是逐渐加大甲醇比例的
一般是点板以后( 当然要用反相板)
确定洗脱极性
然后逐步调高甲醇比例至100% 洗净柱子
如果操作方法都是正确的话
那么说明这个硅胶不合适
建议换体系哇
试试其他填料来分
话说你这个在高液上分离的效果好不好哇?
恩 在HPLC上分离的效果不错的~~
你说的操作方法可不可以给我简单介绍下啊 我想做个对比~·由于初次接触,可能有些细节没有注意到 了哈
了解了~~我以为是从水直接开始冲的呢~·不过我们实验室好像没有反相板子~杯具了
方法没错的话只能说明你的样品不适合用反相,可以试试其它的填料
洗脱系统比例恰当的前提下
应该是反相对样品分离效果一般
试试其他手段 正相 凝胶之类的
柱子有颜色那应该是脱掉的色吧 纯甲醇冲冲应该可以洗干净的
可是相关的文献中有报道用反相可以分开,砸到了我的手里就分不开了呢?我很是纳闷啊
可以最开始不用纯水冲吗?好像有老师给我建议让我用5%或者10%的甲醇在最开始的时候冲,那样成吗?
ods柱子洗脱是逐渐加大甲醇比例的
一般是点板以后( 当然要用反相板)
确定洗脱极性
然后逐步调高甲醇比例至100% 洗净柱子
如果操作方法都是正确的话
那么说明这个硅胶不合适
建议换体系哇
试试其他填料来分
话说你这个在高液上分离的效果好不好哇?
恩 在HPLC上分离的效果不错的~~
你说的操作方法可不可以给我简单介绍下啊 我想做个对比~·由于初次接触,可能有些细节没有注意到 了哈
了解了~~我以为是从水直接开始冲的呢~·不过我们实验室好像没有反相板子~杯具了