我分离的这个物质极性比较大，分子量在800左右，初提物中成分很杂，在前期分离中如果用200-300目的硅胶分，用什么流动相比较好...用过甲醇-氯仿梯度洗脱，但是最后在硅胶柱上有很强的吸附，用纯甲醇不能洗掉...该怎么冲洗?

勿用硅胶分离，建议先用大孔树脂、聚酰胺粗，再使用反相硅胶柱层析，不知你这化合物在中小极性试剂中溶解性怎么样，如果溶解性不好，可用丙酮等试剂尝试沉淀的方法。

建议换柱子

用反相分比较好吧

先试试在水中和在乙醇中的溶解性如何，好的话就上大孔先砍断，不同流分都跑一下HPLC或者反相板，根据情况合并后上ODS。极性要是太大的话ODS的分离效果也不会太好，很容易全都冲下来，这时可以试试凝胶。

我是来学习的