各位亲爱的朋友们，我现在遇到了一个头疼的问题，但这也许是常见的问题。我采用湿法装住，干法上样，选用的洗脱剂在薄层上的Rf值大约0.3左右，但是以相同的极性条件，上柱子，没有任何分离效果，样品全都冲下来了，这是怎么回事呢？还望各位不吝赐教啊！


还是要选一个保守的梯度跑，再换梯度


敢问您用的什么展开剂（洗脱剂）？ 这个差别很大，像丙酮用做展开剂行，洗脱剂就效果很不好

跑薄层的展开剂极性减小10倍


用的氯仿-甲醇体系30：1


减小10倍？我现在用C:M=30：1,那样的话应该用300：1吗？是什么原因呢？

像2个点太近的不只0.3，要再降极性

这很正常 不是洗脱剂的问题，我遇到过不止一次，你可以快速冲柱，一次接的少一点，可以尝试一下刮板，有点效果

你使用的薄层板和你所上柱的固定相（硅胶，聚酰胺等），规格往往不是一样的具有差异性，所以你点板摸的梯度往往不是最理想的洗脱梯度，应该适当的将洗脱梯度减小点。

同意LS，最好的办法就是拿一个已知对照单品，做一次tlc和填料比较实验，看从填料中刚好能洗脱下对照品的洗脱剂，用在tlc上能使此对照品的rf值达到什么位置，心中就有数了。要么你就买tlc材料和柱子材料配套的。