最近在细分中,我用甲醇为洗脱剂湿法上一瓶颜色很深的样品溶液,结果样品挂柱很厉害,不知道如何解决?我不想重装柱子,请高手赐教,
可以尝试换种溶剂冲,如DMSO
可以用小极性的溶剂:丙酮 洗脱3-4个柱体积
如果还不行就只有用低浓度的氯化钠与氢氧化钠混合溶液, 在50C下 煮2-3个小时,再用水洗干净 重新装柱子替换洗脱溶剂即可
可以试试用二氯甲烷或者其他溶剂冲洗,最好不要用甲醇这种极性过大的溶剂上柱子
这要分情况讨论了,其实用甲醇上柱子很正常,如果你已经冲完柱子,凝胶还是有颜色,冲洗2-3个甲醇后,还是不下来,你就不用管它,下次该怎么上样就怎么上样。如果是一都有点颜色,可以试用氯仿和甲醇混合 冲洗 看看效果怎么样
可尝试用氯仿或氯仿甲醇洗脱。
如果你的样品含较多酚羟基或羧基,就很易挂在凝胶上,
建议你别用凝胶了,因为凝胶有一定的反相作用。
这种情况碰到过很多次了,流份接完之后,用2%NaOH溶液洗,很快柱子就干净了。
可以尝试换种溶剂冲,如DMSO
可以用小极性的溶剂:丙酮 洗脱3-4个柱体积
如果还不行就只有用低浓度的氯化钠与氢氧化钠混合溶液, 在50C下 煮2-3个小时,再用水洗干净 重新装柱子替换洗脱溶剂即可
可以试试用二氯甲烷或者其他溶剂冲洗,最好不要用甲醇这种极性过大的溶剂上柱子
这要分情况讨论了,其实用甲醇上柱子很正常,如果你已经冲完柱子,凝胶还是有颜色,冲洗2-3个甲醇后,还是不下来,你就不用管它,下次该怎么上样就怎么上样。如果是一都有点颜色,可以试用氯仿和甲醇混合 冲洗 看看效果怎么样
可尝试用氯仿或氯仿甲醇洗脱。
如果你的样品含较多酚羟基或羧基,就很易挂在凝胶上,
建议你别用凝胶了,因为凝胶有一定的反相作用。
这种情况碰到过很多次了,流份接完之后,用2%NaOH溶液洗,很快柱子就干净了。