本人新手，向各位高手请教几个天然药化的常见问题：
1. 怎样将TLC的条件转移至色谱柱上？是先摸索最优的分离系统后再将极性降低，使最上面的点（或者感兴趣的点）的Rf值为0.2-0.3吗？
2. 梯度洗脱时怎样确定换梯度的极性和时机，如果采用固定体积的梯度洗脱方式，一般一个梯度冲多少体积？如果采用TLC指导洗脱，怎样确定更换极性的时间？梯度要怎样设计？
这些问题感觉对分离效果影响很大，指导！

依次作答：1.先选用合适的色谱柱，再用TLC洗脱条件冲洗就行；将感兴趣的点的Rf值调为0.2-0.3很合适
2.将一个点快冲完时就可换梯度，如果采用固定体积的梯度洗脱方式，应根据色谱柱和样品量来决定洗脱体积；如果采用TLC指导洗脱，怎样确定更换极性的时间？将一个点快冲完即可；梯度要怎样设计？一般要盯住某个点，以此作为参照冲洗，冲完后再换点。
互相学习一下，呵呵！



一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂，某种样品在这种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时，多尝试几种比例不同，成分不同的展开剂。展开剂的极性太小，点分不开，极性太大，也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右为最佳。

一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂

用什么稀释？水吗？

肯定不能用水稀释了，你本来要让极性变小的加水岂不南辕北辙了吗！呵呵、、、应用你所用的展开剂中极性最小的容积进行适当稀释!

也是来学习的受教了

一般是一个梯度洗脱2-3个柱体积啦，不过有的成分之间极性很相近（有色带的更好看清啦）的，可洗脱3-4个柱体积。

学习学习

TLC展开剂的选择可以很多，但是冲柱子，有的溶剂就不合适，所以，在选择展开剂时最好考虑一下可否应用到柱子上面。星辰同学说的对，有点在不同的展开剂中显示的不一样，会有包点的状况，多试几种确定一下为好。
用TLC追踪冲柱，关键要勤快点关注好你要的主成分盯紧了，尤其是条件摸索阶段的时候。固定体积冲洗，应该还是要建立在有一定了解的基础上吧，做预实验什么的。