齐墩果酸五环三萜类极性很小，人参皂苷类极性较大，但是两者都同属三萜类，都是末端吸收203~210nm，按道理说可以采用紫外检测器同时检测。这几天走了几个梯度条件都不理想，我的思路是这样的：先采用中国药典2010版人参项下条件走60min（主要是乙腈-水，水比例较高80~45），然后梯度增加乙腈的比例，走至100min，但是齐墩果酸还是走不出来，请教各位能不能把保留时间限定在100min内，把上述两类成分分离呢？

前提是要保证紫外能够检测到；建议可用100%乙腈试冲，看看在何时出峰，在此基础上再做条件优化。不妨一试

昨天用乙腈-0.05M乙酸铵等度跑齐墩果酸，峰形各方面都可以，接着参考药典三七，把水换成乙酸铵，梯度跑人参皂苷和齐墩果酸混标，结果基线出现负值，呈现出梯度的曲线，不知道各位有何高见？

药典条件不一定是最优的，只要是人定的规矩都有被进一步完善的空间。
关于分析条件的摸索，最适合的（良好的分离度+快速的分析时间）才是最好的。

我也觉得药典不是最好的，我觉得可以先将乙腈的的比例调高，将人参皂苷的出峰时间降低


采用梯度，当人参皂苷出来后，加大乙腈的比例

流动相为：水(A)/乙腈（B）梯度洗脱，梯度洗脱条件为0~8 min：A，80 %，B，20 %；8~20 min：A，65 %，B，35 %；20~35 min：A，30 %，B，70 %；35~40 min：A，30 %，B，70 %；40~50 min：B，100 %；50~60 min：B，100 %；60~70 min：A，80 %，B，20 %。
这是我实验室用的，我们也在做人参皂苷项目，应该没问题，能满足的要求，我们以前思路跟你一样，摸出来的！


具体条件跟色谱图如下，60min前分出三个皂苷峰，110分钟左右齐墩果酸熊果酸分不开。

HPLC条件



色谱图



你在40-100min梯度变化太慢，峰都后移了，浓度梯度提前！

色谱条件还有很大的优化空间，从35分钟开始就可显著加大乙腈比例，不然太费时了，乙腈可是很贵的